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关键词： 食品分析   纳米酶   比色法   金属氧化物   氧化银   有机磷农药  

摘要： 有机磷农药(OPs)因其在防治植物病、虫、草害方面表现出高效性,被广泛使用在农业生产过程中。由于有机磷农药的滥用,农产品和食品中的农药残留问题越来越严重并威胁着人类的健康。为此,本课题以多形态氧化银纳米颗粒作为比色传感信号的输出材料,通过有机磷农药和适配体对AgO模拟氧化酶活性的调控作用,构建了两种具有简单、快速、稳定性好、特异性强等优点的新型农药比色传感器。主要的研究内容如下:(1)利用乐果对立方体AgO的模拟氧化酶活性的增强作用,本文构建了一种简单、稳定、低成本的比色传感器。荧光探针、电化学、自由基追踪、ESR实验、XPS表征、拉曼图谱和酶动力学等实验证实,乐果通过Ag-S键吸附在立方体AgO表面的同时促进了AgO向溶解氧的电子转移,加速·O和O的释放,促进显色底物的催化氧化。该比色传感器在20-160μg·L呈现出良好的线性范围,检测限(LOD)和定量限(LOQ)低至14μg·L和46μg·L,实际样品中平均回收率范围为85.6-98.2%,并对其他竞争农药表现出优异的选择性。(2)本文探究SS2-55适配体对八面体AgO氧化酶活性的调控作用,结合适配体的特异性识别效应,构建一种稳定、特异性强的有机磷农药新型比色适配体传感器。通过Zeta电位、电泳、XPS等实验揭示适配体通过非共价键吸附在八面体AgO上,形成的八面体AgO-SS2-55适配体复合物增大了纳米酶与显色底物之间的静电引力。荧光探针、ESR、电化学、酶促反应动力学等实验表明吸附的核酸适配体促进八面体AgO向溶解氧的电子转移,生成大量的·O和O,从而促进紫色显色底物生成。当传感体系中加入有机磷农药后,则适配体会优先与靶标结合形成稳定复合物而被消耗,无法再增强八面体AgO的氧化酶活性,此时传感溶液呈现浅紫色甚至无色。所构建比色传感器对水胺硫磷在20-100μg·L呈现出良好的线性范围,检测限低至10μg·L,实际样品中平均回收率范围为87.5-96.2%,并具有良好抗干扰能力。综上所述,本论文将不同形态AgO作为比色传感信号的输出材料,构建了两种具有简单、快速、稳定性好、特异性强等优点的新型比色传感器。为实际食品样品的农残大规模检测和现场检测提供了一种快速而高效的替代方案。

关键词： 电感耦合等离子体原子发射光谱法   食品添加剂磷酸   磷矿石   测定  

摘要： 研究电感耦合等离子体原子发射光谱法测定食品添加剂磷酸中As、Fe、Pb、Cd、Cr、S含量和磷矿石中PO、FeO、AlO、CaO、MgO、SiO、KO、NaO含量。测定食品添加剂磷酸时，通过加入85%磷酸(优级纯)试剂的方法，来配制标准溶液并制作工作曲线，以此消除样品的基体干扰；测定磷矿石时，使用磷矿石国家标准物质来配制标准溶液并绘制工作曲线，以此消除样品的基体干扰。该方法准确度和精密度高，能够满足企业生产对分析检测的要求。

关键词： 食品添加剂   黄花菜   鲜味肽   酶解工艺   呈鲜特性  

摘要： 黄花菜（Hemerocallis citrina Baroni）富含多种营养成分且鲜味浓郁，有望成为制备植物型复合鲜味剂的理想原料，但关于其鲜味的物质基础研究和鲜味产品的开发极少。本文以祁东干黄花菜为研究对象，对其呈鲜物质和营养成分进行系统分析，挖掘黄花菜鲜味的主要来源;以黄花菜鲜味源蛋白为原料，通过优化酶的类型和酶解工艺，制备鲜味特征更明显的黄花菜复合鲜味剂;结合感官评价结果对鲜味组分进行分离纯化，采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用仪（UPLC-Q-Orbitrap-MS）鉴定鲜味肽，并运用分子对接模型，研究其与鲜味受体T1R1/T1R3间的相互作用，验证鉴定出来的鲜味肽的呈鲜特性。主要研究结果如下：　　（1）黄花菜鲜味成分分析　　通过对黄花菜中水溶性成分分析显示，黄花菜中含有的游离鲜味成分有氨基酸、核苷酸、琥珀酸和甜菜碱等，氨基酸含量为0.640g/100g，其中鲜味氨基酸含量为0.150g/100g，占游离氨基酸总量的71%，而后三者的含量低于其呈味阈值，可见黄花菜中的鲜味来源为氨基酸。由于氨基酸来源于蛋白，经过测试显示黄花菜中蛋白含量约14.7%，高于常规植物的蛋白含量，其完全水解后可以得到8.229g/100g的氨基酸含量，较游离氨基酸提高了12.8倍，可见黄花菜有生产鲜味肽的物质基础。　　（2）黄花菜鲜味肽酶解工艺研究　　分别采用中性蛋白酶、风味蛋白酶和复合酶三种酶对黄花菜进行酶解，结果显示，相对于水提液而言，这三种酶解方法对黄花菜的水解度、蛋白回收率以及鲜味评分显著提高。得到最优的酶解条件为：中性蛋白酶加酶量0.3%和风味蛋白酶0.4%，酶解时间6.4h，酶解温度49℃，酶解pH=5.87。此条件下测得黄花菜酶解液的水解度为25.67%，蛋白回收率为41.4%，鲜味评分为7.60，多肽含量最高为3.520mg/mL，较水提液分别提高了3.5倍、3.4倍、2.6倍和1.4倍。表明使用优化后的酶解工艺能有效提升黄花菜蛋白的提取效率和黄花菜的鲜味。　　（3）鲜味肽的分离鉴定和呈味机制分析　　黄花菜酶解液中的多肽依次经过超滤法、凝胶色谱层析、反相高效液相色谱纯化和UPLC-Q-Orbitrap-MS分析获得25个肽段;这些肽段又通过生物活性数据库预测和感官增鲜阈值数据分析，进一步筛选得到GSAVGGMVAMEQM、ENTQAERSLLGM、TPSSSFKDAAK、EMVVSLEHVT、EVEFR、TPELLNR、SYEVRAP、SGNLWDA、EVVPSH、VDLFR、NPKIPSVLVAD、DPVFR和TVRVVT等13个鲜味最强的鲜味肽。获得的鲜味肽段与鲜味受体T1R1/T1R3之间分子对接和相互作用分析结果显示，鲜味肽与鲜味受体存在7个关键氨基酸残基结合位点，分别是Asp219、Thr175、Met151、Glu148、Ser217、Thr179和Glu217，鲜味肽的滋味增强作用的特殊氨基酸残基为Gln181和Thr179，鲜味增强作用氨基酸残基为Tyr182。鲜味短肽（六肽以下）的鲜味与氨基酸的性质关系密切，需要提高极性氨基酸（Glu，Asp，Arg，Tyr等）或芳香族氨基酸的含量来提高鲜味。鲜味长肽（六肽以上）需要考虑疏水相互作用，控制疏水氨基酸的数量，添加助味氨基酸（Gly，Ser）来提升鲜味。

关键词： 食品卫生   猪肉管理   呆猪  

摘要： 饮食卫生与人们身体健康密切相关,猪肉作为中国最主要的肉类食品之一,对它的管理很早就开始了。在晚清民国时期,伴随中国近代化的起步和发展,近代上海在饮食卫生管理方面走在了前列,在猪肉管理方面则实现了由传统模式向近代模式的过渡。围绕猪肉尤其是呆猪肉的卫生问题,华界各方展开了一系列博弈,采取了诸多改良方法,由此折射出中国肉类食品安全管理近代演进历程。具体而言,随着清末地方自治运动兴起,上海华界自治组织向公共租界模仿学习,建立了一套猪肉管理制度。由于中、西兽医知识体系对牲畜疾病的不同认识,新建立的猪肉管理制度存在缺陷,从而引发呆猪管理这个新的社会问题。北洋时期,上海华界呆猪管理,主要是通过凌公记宰作、新普育堂呆猪熬油厂等机构实现。从它们的兴废变化可以认识到,呆猪管理是如何从中兽医模式转变为西兽医模式,以及西兽医模式占据优势的原因。南京国民政府成立后,上海市卫生局和兽医院成立以及公共屠宰场、熬油厂收归官办,标志西兽医模式下的猪肉管理成功建立。呆猪管理的近代转型过程,反映了过渡时期中西畜病观念的差异与融合,揭示了民间、官方、军方等多种力量在合作与冲突中,主动与被动交织,共同完善以猪肉为代表的公共食品安全的复杂过程。

关键词： 食品化学   植物甾醇酯   交联酶聚集体   酯化效率   营养价值  

摘要： 植物甾醇作为新资源食品，具有降低胆固醇含量、保护心血管健康、抗炎以及抗癌等功效，是国际营养学会推荐的未来十大功能性营养成分之一，被科学家们誉为“生命的钥匙”。但由于自身熔点高、溶解性差等性质导致生物利用度较低。通过与脂肪酸发生酯化反应获得的植物甾醇酯具有更好的脂溶性，吸收利用率比植物甾醇提高了5倍。当前植物甾醇酯工业化生产主要采用化学合成工艺，由于高温反应条件存在不可避免的脱水、氧化等副反应，导致产品分离纯化难、产物品质低等问题。而酶催化合成植物甾醇酯具有反应条件温和、绿色、选择性高等优点，备受学术界和产业界的关注。但酶法目前工艺尚不成熟，缺乏高性能的专用脂肪酶制剂，现有酶制剂稳定性低，成本高，不能满足工业应用要求，技术经济性差。另一方面，酶催化普遍需要较长的反应时间，传统酶法的反应混合物含有有机溶剂，会使产品的纯化和催化剂再利用的难度提高。本文以催化植物甾醇酯化效率最高的皱褶假丝酵母脂肪酶（Candida rugosa lipase，CRL）为研究对象，通过酶分子修饰耦合新型固定化方法，对游离CRL的活性和稳定性进行调控，得到活性高、稳定性好的固定化CRL。并进一步将其应用到酶法合成植物甾醇酯中，结合超声预处理高粘度底物技术，以强化酶催化反应效率。主要内容如下：　　（1）选择了一种带有氨基官能团的新型离子液体（FIL，1-氨乙基-3-甲基咪唑溴盐）对脂肪酶进行表面化学修饰，并与酶交联聚集体（CLEAs）固定化技术相结合。结果表明获得的固定化脂肪酶CRL-FIL-CLEAs的动力学参数米氏常数（Km）值（4.80mM）小于未添加修饰剂的固定化酶（CRL-CLEAs）（8.06mM），CRL-FIL-CLEAs对底物的亲和力提高。CRL-FIL-CLEAs（5.51U/mg protein）的活性是CRL-CLEAs的1.9倍。CRL-FIL-CLEAs受温度变化的影响降低，60℃处理50min后，CRL-FIL-CLEAs仍保持了61%的活性，而CRL-BSA-CLEAs（BSA为修饰剂）和CRL-CLEAs的活性分别保留了42%和22%;CRL经固定化处理后，对环境酸碱性的稳定性提高;CRL-FIL-CLEAs重复使用5次后保留了51%的活性，而CRL-BSA-CLEAs和CRL-CLEAs残留活性仅为33%和22%;室温下储存四天，CRL-FIL-CLEAs保留了37%的活性，CRL-BSA-CLEAs和CRL-CLEAs分别保留了33%和32%。FT-IR图谱证实了CLEAs的成功制备。在SEM图谱中观察到脂肪酶固定化后的结构使底物分子更容易进入脂肪酶催化位点，减少了传质限制，从而提高了CRL-FIL-CLEAs的催化效率。以上结果表明，离子液体修饰的CRL-FIL-CLEAs是一种性能优异的酶制剂。　　（2）引入氨基功能化的磁性纳米粒子Fe3O4-NH2作为载体，构建了一种离子液体修饰的新型磁性交联酶聚集体（CRL-FIL-CLEAs@Fe3O4）。CRL-FIL-CLEAs@Fe3O4的活性提高至8.48±0.25U/mg protein，是CRL-FIL-CLEAs的1.5倍。同时，CRL-FIL-CLEAs@Fe3O4热稳定性、储存稳定性、有机溶剂耐受性和重复使用性提高。室温下储存15天后，游离CRL仅残留28%的活性，而CRL-FIL-CLEAs@Fe3O4保留了73%的活性。CRL-FIL-CLEAs@Fe3O4在异丙醇、乙腈、乙酸乙酯和正己烷中可以保持88%以上的活性，重复水解棕榈酸对硝基苯酯11个循环后仍保留高达83%的水解活性。FT-IR结果表明，CRL-FIL-CLEAs@Fe3O4制备成功，VSM结果证明固定化酶具有超顺磁性。固定化后CRL-FIL-CLEAs@Fe3O4的二级结构发生了变化，α-螺旋的减少和β-折叠的增加使得蛋白质微环境的疏水性增强，活性中心暴露，加快了酶与底物的结合。热重分析（TGA）结果分析固定化酶的负载量为0.1627mg protein/mg CRL-FIL-CLEAs@Fe3O4。分子动力学模拟结果表明，离子液体改变了酶活性中心的微环境。固定化前后，脂肪酶的RMSD值无明显变化，固定化酶在水解催化体系中的平衡性没有受到影响。　　（3）无溶剂体系中固定化脂肪酶催化植物甾醇与油酸的酯化反应，CRL-FIL-CLEAs@Fe3O4展现出了较高的甾醇酯化活性，并且超声预处理能够有效的强化无溶剂高粘度体系的传质过程，显著缩短反应的时间。优化后反应条件如下：预处理时间为15min，超声功率为120w，油酸与β-谷甾醇摩尔比为6:1，固定化酶用量为植物甾醇质量的10wt%，反应温度为48℃，植物甾醇酯化率在9h内达到了94.72%。核磁共振波谱结果明确了终产物为β-谷甾醇油酸酯。CRL

关键词： 食品化学   茶油脱臭馏出物   植物甾醇   脂质体   膜稳定剂  

摘要： 植物甾醇（phytosterols）结构与胆固醇类似，因具有降血脂、抗炎、抗癌以及抗氧化等生物学活性，被广泛应用于食品、保健品和药品等领域。在食品基质中，脂质体是包埋活性物质及控制其释放的有效工具，其中胆固醇通常被掺入脂质体以稳定磷脂膜，出于营养安全考虑，使用来自胆固醇类似物中的植物甾醇作为脂质体膜稳定剂的趋势正在兴起。茶油脱臭馏出物富含大量植物甾醇，为避免资源浪费，保护环境以及高值化利用甾醇，本文以茶油脱臭馏出物为原料，首先进行甾醇的提取，随后考察甾醇对脂质体性能的影响，为甾醇的应用提供新思路，具体研究内容与结论如下：　　（1）茶油脱臭馏出物成分检测及甾醇的粗提　　检测了茶油脱臭馏出物中的主要成分，在此基础上，利用正交和AHP-熵权法优化甾醇的皂化粗提工艺。结果得知，脱臭馏出物成分以游离脂肪酸和甘油酯为主，其含量在90%以上，而甾醇相对较高，约5.74%左右;此外，最优粗提工艺条件为碱浓度1mol/L，液料比5∶1，皂化时间150min，皂化温度90℃，此时粗提物中甾醇含量达53.49%。　　（2）甾醇的精制及鉴定　　采用正交法优化甾醇的结晶精制工艺，随后分别对粗提甾醇和精制甾醇进行GC-MS鉴定。结果显示最佳精制工艺条件为石油醚作溶剂，液料比9∶1，结晶时间8h，结晶温度0℃，此时结晶物收率达49.47%;经鉴定，粗提甾醇含6种甾类化合物，而精制甾醇含3种甾醇，分别是醋酸豆甾醇、β-谷甾醇乙酸酯、醋酸羊毛甾醇，总相对含量达90.48%。　　（3）脂质体的处方前研究及其制备　　建立了VC包封率的测定方法，随后采用正交优化脂质体的处方。结果显示，脂质体的乙醇破乳法符合含量测定要求，鱼精蛋白凝聚法测定包封率重现性良好，操作简便成本低;另外，脂质体最优处方为磷脂量50mg，磷脂甾醇比5∶1，VC量4mg，PBS体积20mL，此时VC包封率达61.16%。　　（4）脂质体的表征及性能　　以含精制甾醇的脂质体为实验组，而分别含β-谷甾醇、豆甾醇、胆固醇以及不含甾醇的脂质体为对照组，系统考察各组脂质体的性能。结果表明，当脂质体掺入来自茶油脱臭馏出物中的精制甾醇时，囊泡表现出与β-谷甾醇组类似的良好性能，胆固醇组次之，然而豆甾醇的掺入不利于囊泡分散，其非囊泡组件增加以及PDI高达0.6;此外，精制甾醇组的VC稳定性、缓释特性、抗氧化活性以及生物利用度显著改善;各组含甾醇的脂质体中VC释放遵循一级动力学模型，Fickian扩散支配着释放机制，目前的工作清楚地表明这种甾醇促进脂质体的形成和VC的包封。

关键词： 食品分析   思政元素   大学生   国防教育  

摘要： 食品分析结合国防教育是一种新型的教学方法,统筹了思想政治教育和专业知识教学,可完成对大学生全面培养的要求。食品分析课程在传授专业知识的同时,完成对大学生的思想政治教育,实现了食品科学与工程专业课程建设中对人才素质培养的要求。

关键词： 食品添加剂  

摘要： 三伏盛夏，来一支冷饮，甜蜜又凉爽。但近日，有人在31℃的室温下将某知名品牌雪糕放在一敞开的盒子里。半小时后，雪糕表面的冰层才化开，呈奶油状。50分钟后，盒子里的雪糕仍是比较粘稠的乳状物。一时间，“不会化的雪糕”冲上网络热搜，人们不禁要问：雪糕中是否过量使用了食品添加剂？“食品添加剂”由此被推上了风口浪尖。

关键词： 食品添加剂   硫酸铝钾   肠道菌群   代谢组学   脂代谢  

摘要： 铝(aluminum,Al)是自然界广泛存在的一种金属元素,自发现以来已经得到非常广泛的应用,如食品添加剂、药品佐剂等。在食品添加剂方面,含铝化合物硫酸铝钾可作为膨松剂、稳定剂加入到食品中。由于铝属于人体非必需元素,其对生物体的毒性受到越来越多的关注,无论是体外在细胞层面上的机制探索,还是体内哺乳动物上对神经系统、肝脏等组织疾病的研究,都得到了广泛开展,但铝在机体内明确的作用机制仍然未被阐明。因此,找到铝作用的靶点及机制是减少铝毒性伤害的关键。本研究采用被广泛用于食品中的食品添加剂硫酸铝钾作为研究对象,首先在体外昆虫细胞实验探究铝对细胞毒性及作用机制;然后用哺乳动物小鼠进行体内实验,进一步借助于菌群测序、代谢组等组学分析铝对菌群及代谢产物的影响及致病机制,开创了“铝-肠-脑”轴、“铝-肠-肝”轴的作用机制新思路。主要研究结果如下:1.硫酸铝钾对草地贪夜蛾细胞(Sf9)的细胞毒性及基因表达的影响。本章以自然界广泛存在的昆虫细胞为研究对象,体外进行铝作用机制的初步探究,利用含梯度浓度铝(4.5x10-4.5照/ml)的培养基对Sf9细胞进行培养,发现铝的存在改变了细胞的形态,降低细胞活力,最终导致细胞凋亡,并呈浓度、时间依赖关系。提取对照组和铝处理组细胞的RNA,通过RNA-Seq转录组分析,发现铝处理组的RAPTOR、PDPK1、CRYAB和HSPA1基因表达受到抑制,导致长寿调节通路和PI3k-AKT信号通路等m TOR相关通路的改变,促进细胞凋亡。另一方面,铝离子导致了GST、HPGDS和SE基因的过表达,诱导细胞内氧化损伤,通过一系列级联反应影响细胞增殖和凋亡。此外,上调的差异基因与细胞色素P450相关通路有关,表明铝可诱导细胞色素的解偶联,催化活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生,从而产生毒性作用。2.硫酸铝钾对小鼠的认知及组织理化指标的影响。本章以ICR小鼠为研究对象,分为对照组、低剂量组和高剂量组,分别自由进食不含(0 g/kg)、含低剂量(20 g/kg)和高剂量(50g/kg)硫酸铝钾的饲料。体重称量发现,随着铝浓度增加,小鼠体重增长率呈下降趋势(高剂量组增长率分别为9.37%、4.98%、4.76%、1.14%),说明铝抑制了小鼠的正常生长。第60和120天的血常规分析显示,低剂量组血液中各种白细胞的变化不大,高剂量组则有了显著变化,说明铝是一种慢性毒性物质,与浓度和作用时间有关,在持续高浓度作用下,血液免疫细胞产生了较强的免疫反应。动物行为学测试中,旷场实验和高架十字测试结果表明,铝对小鼠的焦虑情绪没有产生显著影响;新物体识别和水迷宫则发现,铝处理组的小鼠空间记忆方面的认知出现了下降,说明铝导致了小鼠的认知功能障碍。组织的HE染色切片可以看出,脑部和肝脏有炎症和病变现象存在,说明铝引起小鼠神经性疾病和肝损伤。肝脑组织的氧化应激相关指标显示,含铝组的MDA含量显著升高(高剂量组肝脑分别提高31.52%、14.53%),而CAT、GSH-Px等酶活显著降低,MAO、TC等功能指标出现异常,说明了铝参与促进了肝、脑组织的氧化损伤,并导致肝脏中脂代谢异常及大脑认识功能下降;肝和脑组织中促炎因子TNF-a、IL-1P含量结果表明,含铝组脑组织中2种促炎因子相对于肝脏变化更显著(分别提高39.80%、51.14%),且呈浓度依赖性,说明大脑是铝作用的重要靶点组织;荧光定量PCR检测了Cysltrl、Nfe2l2、Hmoxl等基因的表达,从基因层面反应了铝对小鼠炎症疾病的影响。3.硫酸铝钾对小鼠粪便中菌群组成的影响研究。本章通过对小鼠的粪便进行高通量测序,分析了各组粪便中微生物的组成及差异。a多样性表明了随着铝处理组剂量增加,微生物多样性先增加和减少,对菌群造成了较大影响。P多样性显示了各组间菌群物种组成和群落结构差异显著,产生明显变化。在细菌门水平上筛选出了3个最丰富的细菌群落分别是厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门,平均占比分别为对照组97.59%,低剂量组94.71%、高剂量组96.25%。在属水平上筛选到丰度最高的前4个有明确分类名称的属分别为:乳杆菌属、双歧杆菌属、葡萄球菌属、苏黎世杆菌属。最后,根据差异菌种丰度分析,在种水平上筛选出了假长双歧杆菌、尼布尔葡萄球菌、鼠乳杆菌、罗伊氏乳杆菌四种微生物,结合苏黎世杆菌属,进一步的分析说明了该五种微生物可能是铝对肠道菌群扰动作用的主要靶点。4.硫酸铝钾对小鼠粪便中代谢物的影响研究。本章对小鼠粪便中的代谢物进行气相色谱-质谱(Gas Chromatography-Mass Spectrometer,GC-MS)检测和差异代谢物生信分析。主成分分析模型PLS-DA概览显示R2Y和Q2的值分别为0.983和0.794,说明该模型有良好的可解释和可预

关键词： 孕期   前额皮质   细胞因子   ATP8A2   情绪行为  

摘要： 目的:旨在探明孕期小鼠同时暴露于人类日常饮食中含有的多种每日可接受/可耐受摄入量的食品添加剂和农药后,对子鼠炎症状态和情绪相关行为的影响,并进一步探索可能的影响机制。研究方法:1.第一部分实验:24只SPF级C57BL/6小鼠在妊娠第0天(Gestational day 0,GD0)随机分为对照组和实验组。实验组的处理方法为孕鼠自由摄入溶有多种每日可接受/可耐受摄入量的食品添加剂和农药混合物(Acceptable/Tolerable daily intake of food additive and pesticide chemical mixtures,AFACM)的饮用水,该处理简称为AFACM暴露。AFACM暴露时长从小鼠妊娠第0天开始至分娩结束。AFACM暴露结束后,在分娩当天评估孕期AFACM暴露对妊娠结局、子鼠一般健康状态、子鼠的血清、前额皮质(Prefrontal cortex,PFC)和海马组织中干扰素(Interferon,IFN)-γ、白介素(Interleukin,IL)-6、IL-12p70、肿瘤坏死因子(Tumour necrosis factor,TNF)-α和单核细胞趋化蛋白-1水平的影响。在子鼠出生后第56天(Postnatal day 56,PND56),评估AFACM暴露对情绪相关行为的影响。根据相关参考文献,本研究采用的AFACM所含化学物质的成分与暴露剂量如下:西维因(0.0075 mg/kg/d)、乐果(0.001 mg/kg/d)、草甘膦(0.5mg/kg/d)、灭多威(0.0025 mg/kg/d)、甲基对硫磷(0.003mg/kg/d)、三唑酮(0.03 mg/kg/d)、阿斯巴甜(40 mg/kg/d)、苯甲酸钠(5 mg/kg/d)、乙二胺四乙酸(2.5 mg/kg/d)、对羟基苯甲酸乙酯(10 mg/kg/d)、对羟基苯甲酸丁酯(0.5 mg/kg/d)、双酚A(0.004 mg/kg/d)和阿拉伯树胶(34 mg/kg/d)。2.第二部分实验:24只SPF级C57BL/6小鼠在GD0随机分为CON组和AFACM组。AFACM暴露方案同“第一部分实验”。AFACM暴露时长为从小鼠GD0开始至GD12.5或GD18。评估AFACM暴露对胎龄12.5天(Embryonic day 12.5,ED12.5)和ED18时胎鼠血清和PFC中炎症因子水平的影响。30只SPF级C57BL/6小鼠在GD0随机分为CON组、AFACM组、AFACM+anti-IFN-γ组、AFACM+Ig G1组和anti-IFN-γ组。CON组和anti-IFN-γ组孕鼠自由摄入普通饮用水,其他实验组孕鼠自由摄入溶有AFACM的饮用水。AFACM暴露方案同“第一部分实验”。注射中和性anti-IFN-γ抗体的时间为从GD12.5开始注射至分娩。在PND7和PND14,评估AFACM暴露对子鼠血清和PFC中炎症因子水平的影响。在PND56,评估AFACM暴露对情绪相关行为的影响。从而评估中和IFN-γ是否阻断/减轻AFACM暴露对子鼠炎症状态和情绪相关行为的影响。3.第三部分实验:30只SPF级C57BL/6小鼠在GD0随机分为CON组、AFACM组、AFACM+anti-IFN-γ组、AFACM+Ig G1组和anti-IFN-γ组。CON组和anti-IFN-γ组孕鼠自由摄入普通饮用水,其他实验组孕鼠自由摄入溶有AFACM的饮用水。AFACM暴露的成份、剂量和时长同“第一部分实验”。注射中和性anti-IFN-γ抗体的方法同“第二部分实验”。在PND7,用Western Blot和免疫荧光技术检测各组动物PFC中ATP磷脂翻转酶8A2(ATPase phospholipid flippase 8A2,ATP8A2)的水平,评估AFACM暴露对ATP8A2是否有影响以及IFN-γ在其中可能具有的介导作用。结果:1.与对照组相比,AFACM组妊娠结局无显著改变,AFACM组母鼠肝功能指标、孕晚期体重及分娩后子宫/卵巢重量也无显著改变(均P>0.05),AFACM组母鼠血清中IFN-γ水平显著升高(P<0.05)。与对照组相比,AFACM组子鼠肝功能指标无显著改变(P>0.05),AFACM组子鼠血清IFN-γ水平、PFC中IFN-γ、IL-6和TNF-α水平、海马IFN-γ水平均显著增加(均P<0.05)。另外,与对照组相比,AFACM组子鼠在成年期表现出情绪行为异常(均P<0.05)。2.与对照组相比,孕期AFACM暴露增加了ED18时胎鼠血清中IFN-γ的水平(P<0.01),增加了PFC中IFN-γ和IL-6的水平(均P<0.001)。AFACM暴露不改变ED12.5时胎鼠炎症因子的水平。与对照组相比