关键词:
表面等离子体共振
狂犬病毒
AuNPs
生物传感器
摘要:
狂犬病是通过狂犬病毒(Rabies Virus,RV)引发的一种传染性疾病,它会进入人体然后攻击中枢神经系统,从而使受体感染发病,它的病死率几乎为100%,到目前为止都无特效药物治疗。我国属于狂犬病高风险地区,因此,无标记、高灵敏度和方便快捷的RV检测传感器的研发制备是非常有必要的。本文研究以表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)为基本工作原理的光纤生物传感器,并且制备了三种不同的光纤SPR传感器,实现对RV的痕量检测以及多个方面的性能研究,主要研究内容如下:
(1)制备了一种基于SPR的光纤RV检测的探针式生物传感器。利用物理气相沉积技术蒸镀银膜(Ag),塑料包层多模光纤四周蒸镀银膜是为了激发SPR效应,端面则是为了作为反射面,形成一个反射式的传感结构。以巯基十一烷酸为功能化材料提供羧基基团,和RV抗原产生稳定的共价键结合,成功实现对低浓度RV抗体的无标记高灵敏检测。此外,使用白光干涉仪对传感器表面形貌进行表征,进一步以RV抗原为识别单位固定于传感器表面,针对RV抗体进行检测。实验结果表明,该传感器能检测的浓度范围为0.1pg/m L-10~3pg/m L,可实现的灵敏度为2.10635nm/(log(pg/m L)),最小检测限(Limit of detection,LOD)为0.1336pg/m L,对该传感器的最低检测限和检测范围等参数进行分析,最后对其选择性、稳定性等性能进行评估,该传感器与酶联免疫吸附测定(ELISA)同时对临床样本进行检测,二者检测结果基本一致,表明该传感器在RV的临床检测上具有良好的应用前景。
(2)制作了一种基于SPR和局部表面等离子体共振(localized surface plasmons resonance,LSPR)的双通道的光纤生物传感器。该传感器使用多模光纤(Multi-mode fiber,MMF)和四芯光纤(Four-core fiber,FCF),通过级联两种不同芯径的光纤来形成MMF-FCF-FCF-MMF的透射式结构,通道1利用LSPR效应,在FCF表面涂敷一层金纳米颗粒(AuNPs)/金属有机框架材料/硫代苹果酸复合材料作为免疫传感通道,通道2采用SPR效应,在其表面涂敷Ag/二甲基硅油作为温度传感通道。此项工作提出使用盐酸多巴胺材料涂层分离两个传感通道的共振峰,使之独立不受干扰,实现RV抗体浓度和温度的同时检测。对该传感器的LOD和灵敏度进行分析,最后对其选择性、稳定性、临床实验等性能进行评估。
(3)提出了一种基于MXene/AuNPs敏感膜的光纤SPR生物传感器,透射式的传感结构为两端多模光纤中间级联一段单模光纤(Single-mode fiber,SMF),形成MMF-SMF-MMF的传感结构。对比测试了分别涂敷MXene的MXene/AuNPs敏感膜的传感器的灵敏度,确定以MXene/AuNPs作为敏感膜的光纤SPR传感器对0.1pg/m L-10~3pg/m L浓度范围内的RV进行光谱响应测试。实验结果表明,该传感器在此范围内光谱共振波长红移13.538nm,可实现的灵敏度为3.26462nm/(log(pg/m L)),LOD为0.153pg/m L,对该传感器的检测范围等参数进行分析,最后对其选择性、稳定性等性能进行评估,同时该传感器对临床样本的检测结果与ELISA检测结果基本一致,表明该传感器在RV的临床检测上具有良好的应用前景。