关键词:
纳秒脉冲电场
黑色素瘤
细胞焦亡
免疫原性
细胞因子
免疫响应
摘要:
近年来,纳秒脉冲电场(nanosecond Pulsed Electric Fields,nsPEFs)作为一种潜在的癌症治疗手段备受关注。本研究旨在探究纳秒脉冲电场对黑色素瘤的治疗效果,并研究其诱导黑色素瘤细胞焦亡及激发机体免疫的生物效应。本文选择B16F10(小鼠皮肤黑色素瘤细胞)作为实验对象,采用nsPEFs(200 ns、1 Hz)对体外和体内的肿瘤细胞进行处理,并通过细胞学、分子生物学和免疫学技术来评估细胞的生存状态、焦亡情况,细胞中的相关蛋白和分子以及免疫相关分子的表达水平。实验结果表明,nsPEFs刺激后细胞膜表面起泡,膜通透性增加,剪切的Caspase-1和剪切的GSDMD蛋白表达增加,说明nsPEFs刺激可有效诱导黑色素瘤细胞发生焦亡;免疫损伤相关分子(DAMPs:如钙网蛋白(CRT)、热休克蛋白 70(HSP70)和高迁移族蛋白(HMGB1))的表达提高,表明nsPEFs引起的细胞死亡具有免疫原性;受nsPEFs刺激后,肿瘤体积逐渐消融,大量活化的树突状细胞(DCs)、CD8+T细胞在肿瘤组织中出现。血清中IL-12、TNF-α、IFN-γ表达升高,而IL-10和TGF-β1表达降低,提示小鼠可能通过相关因子的释放激发免疫响应路径,在nsPEFs消融后参与抗肿瘤效应;肿瘤挑战试验发现,在特异性免疫应答的伴随下,nsPEFs刺激组的肿瘤生长受到明显抑制。结果表明nsPEFs具有抗黑色素瘤作用,并可短期激发机体免疫系统来增强治疗效果。