关键词:
肝细胞癌
柴芪益肝颗粒
巨噬细胞极化
H22荷瘤小鼠
信号通路
摘要:
目的:探讨柴芪益肝颗粒对H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤相关巨噬细胞极化的调控作用及机制。方法:50只SPF级雄性昆明小鼠,H22肝癌细胞左腋下皮下注射构建H22肝癌荷瘤小鼠模型,模型构建成功后,采用随机数字表法将小鼠随机分为模型组、索拉非尼(50 mg/kg)阳性对照组及柴芪益肝颗粒低(24.83 g/kg)、中(49.66 g/kg)、高(99.32 g/kg)剂量组,每组10只,按照分组灌胃相应药物14 d后取材。HE染色观察小鼠肿瘤组织病理形态变化,免疫荧光双标法检测小鼠瘤体组织CD86、CD163蛋白表达,ELISA法检测血清IL-10、TNF-α水平,RT-PCR检测小鼠瘤体组织中i NOS、Arg-1、IL-4、IL-10、IL-1β、TNF-α m RNA表达,Western Blot检测小鼠瘤体组织中i NOS、Arg-1、IL-4、IL-10、IL-1β、TNF-α及PI3K/AKT/m TOR和p38 MAPK信号通路蛋白表达。结果:与模型组比较,各给药组小鼠肿瘤细胞核体积明显缩小,细胞数量明显变少,染成红色的区域明显增大,部分肿瘤细胞被破坏,暴露细胞质并产生核碎片,增殖受到抑制;肿瘤组织CD86表达升高,CD163表达降低,血清IL-10水平降低、TNF-α水平升高,肿瘤组织Arg-1、IL-10、IL-4 m RNA及蛋白表达降低,iNOS、IL-1β、TNF-α m RNA及蛋白表达升高,PI3K、AKT、mTOR蛋白磷酸化水平降低,p38 MAPK磷酸化水平升高。结论:柴芪益肝颗粒可促进H22荷瘤小鼠巨噬细胞向M1型极化,抑制其向M2型极化,从而改善肿瘤微环境,其机制与抑制PI3K/AKT/m TOR的活化和促进p38 MAPK信号通路的激活有关。