关键词:
基质金属蛋白酶7
巨噬细胞极化
半乳糖凝集素3
免疫应答
摘要:
为研究基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase 7,MMP-7)过表达对巨噬细胞极化、半乳糖凝集素3(galectin 3,Gal-3)表达和炎性因子分泌的影响,诱导THP-1细胞成巨噬细胞,转染MMP-7过表达和空载质粒,将实验细胞分为对照组、MMP-7过表达组、MMP-7 NC组、M1型诱导组和M2型诱导组。qPCR法检测Gal-3、MMP-7 mRNA表达水平;流式细胞术双标法检测F4/80^(+)、CD86^(+)、CD206^(+)巨噬细胞百分比;ELISA检测细胞上清液中炎性因子IL-1α、IL-6及TGF-β含量。使用Gal-3抑制剂处理M1型和M2型诱导分化巨噬细胞,qPCR法检测细胞中Gal-3 mRNA表达变化,ELISA检测细胞上清液中IL-1α、IL-6和TGF-β含量。结果显示,与对照组相比,MMP-7过表达组和M2型诱导组中Gal-3、MMP-7 mRNA表达显著上升(均P<0.01),(F4/80^(+))/CD206^(+)巨噬细胞百分比比值显著上升(均P<0.01),TGF-β浓度显著上升(均P<0.01),IL-1α、IL-6浓度显著下降(均P<0.01);M1型诱导组(F4/80^(+))/CD86^(+)巨噬细胞百分比比值显著上升(P<0.01),TGF-β浓度显著下降(P<0.01),IL-1α、IL-6浓度均显著增加(均P<0.01)。与M1型诱导组相比,M1型+Gal-3抑制剂组Gal-3 mRNA相对表达量显著下降(P<0.01),TGF-β浓度显著增加(P<0.01),而IL-1α、IL-6浓度显著下降(均P<0.01)。与M2型诱导组相比,M2型+Gal-3抑制剂组Gal-3 mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),TGF-β浓度显著增加(P<0.01),而IL-1α、IL-6浓度显著下降(均P<0.05)。上述研究证明,MMP-7可上调Gal-3表达,进而促进巨噬细胞向M2型极化,发挥抗炎作用。