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关键词： 猫杯状病毒   NS2蛋白截短   原核表达   多克隆抗体  

摘要： 旨在鉴定并深入研究NS2蛋白在猫杯状病毒(FCV)感染中的作用。根据FCV SH2014株的基因序列,利用生物信息学技术对NS2蛋白进行了分析,将其在110 aa处截短为2个基因片段(NS2-N和NS2-C),将2个NS2-N相连接。筛选出成功表达的重组蛋白,使用弗氏佐剂乳化后免疫新西兰大白兔。通过Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)验证多克隆抗体的特异性识别能力。结果:成功构建了pET-32a-NS2-N和pET-32a-NS2-N-N重组质粒,并在上清液和包涵体中稳定表达了预期大小的重组蛋白。制备的多克隆抗体能特异性识别多个病毒株的NS2蛋白。结论:成功制备兔抗NS2蛋白的多克隆抗体,为深入研究FCV NS2蛋白的结构和功能提供了试验材料,为进一步阐明该病毒的致病机制奠定基础。

关键词： 生物信息学   玉米   乙烯响应因子   转录因子  

摘要： 为了全面了解玉米APETALA2/乙烯响应因子(AP2/ERF)超家族中ERF亚家族成员在玉米生长发育和逆境过程中的作用,利用生物信息学手段鉴定和分析玉米Zea mays L.B73基因组ERF亚家族成员。结果表明:共鉴定到87个ERF基因且不均匀地分布在玉米的10条染色体上,蛋白序列长度为124~603 aa,蛋白质分子质量为13.23~65.44 kDa,理论等电点为4.44~10.84,亚细胞定位于细胞核;进化树分析显示,ERF基因被分为5个组,各组内的基因结构和保守基序的数量、分布等相似,但各组之间存在较大的差异,多数没有内含子,有内含子的基因占比为20.69%;ERF亚家族成员共有10个保守基序,其中前2个保守基序最为保守,且通常以串联方式存在于多数ERF亚家族成员中;启动子分析显示ZmERF基因含有大量光响应、激素响应、胁迫响应和生长发育相关元件,表明玉米ERF亚家族成员在玉米生长发育及非生物胁迫、生物胁迫方面发挥作用。

关键词： 高尿酸血症   尿酸性肾病   肠道菌群   痛风  

摘要： 近年来随着我国居民经济水平的不断提高,高尿酸血症的发病率逐年增高,并且发病人群逐渐趋于年轻化.长期的血清尿酸高不仅极大的增加了痛风发作的风险,还会导致尿酸性肾病等疾病的发生,给人们的正常生活和身体健康带来了极大的负担.尿酸在体内的排泄大部分是通过肾脏完成,小部分由肠道排泄.随着肠道生态系统理论的成熟和肠道工程菌出现,肠道生态系统也被称为了人体健康的“晴雨表”.人体肠道内环境稳态与人体尿酸代谢的相互调控作用也逐渐明朗.因此,综述肠道菌群对高尿酸血症以及尿酸性肾病的双向通道作用,为高尿酸血症以及尿酸性肾病的防治提供新的参考.

关键词： 酿酒葡萄园   生态系统   碳储量   分配特征   贺兰山东麓  

摘要： 为阐明贺兰山东麓酿酒葡萄园生态系统碳储量特征,以银川市永宁县玉泉营葡萄园为研究对象,通过测算葡萄不同物候期的地上植被碳储量、土壤碳储量和土壤呼吸速率等指标,分析葡萄园生态系统碳储量的时空变化特征。结果表明:(1)葡萄植株碳储量随植株生长而逐渐增加,在浆果采收期各器官碳储量表现为根(2.40 t·hm^(-2))>多年生枝(2.14 t·hm^(-2))>果(1.26 t·hm^(-2))>叶(0.65 t·hm^(-2))>一年生枝(0.60 t·hm^(-2));1 m深度土壤碳储量随土层加深而逐渐下降,土壤有机碳储量主要集中在0~20 cm土层。葡萄植株地上部碳储量随生育进程的推进而显著增加,土壤碳储量无显著变化,葡萄园植被碳储量主要集中于多年生部分,多年生根和多年生枝的碳储量占比分别为39.28%和32.76%。(2)土壤呼吸速率(0~10 cm土层)均值为1.78μmol·m^(-2)·s^(-1),浆果生长期的土壤呼吸速率最大;土壤温度和湿度是影响土壤呼吸速率的主要因素,对土壤呼吸速率变化的解释率分别为90.9%和41.2%;土壤呼吸速率与土壤0~10 cm土层的温度和湿度均呈显著的正相关关系。(3)葡萄园生态系统酿酒葡萄品种‘霞多丽’在7 500株·hm^(-2)的种植密度下,当年总碳储量为49.84 t·hm^(-2),各组分碳储量表现为土壤(42.29 t·hm^(-2),占比84.85%)>植株(7.05 t·hm^(-2),占比14.15%)>杂草(0.27 t·hm^(-2),占比0.54%)>修剪凋落物(0.23 t·hm^(-2),占比0.46%)。贺兰山东麓酿酒葡萄园生态系统在葡萄生长季能将固定的碳主要储存于土壤层和植株多年生木质部分,有较强的碳汇能力。

关键词： 狼疮性肾炎   治病求本   免疫机制   本虚   中西医结合  

摘要： 狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)是系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)严重的器官表现之一,也是SLE患者死亡的一大重要原因。本文通过梳理中医对狼疮性肾炎病机的认识,认为本虚是LN发生的重要前提条件,并将精气虚损、脏腑阴阳失调的中医病机与基因调控异常、补体系统异常活化等免疫机制相联系,基于治病求本理论进行相关讨论,为“求本”赋予新内涵,以期为LN诊治提供一定的理论参考。

关键词： 儿童   流行性感冒   新型冠状病毒感染   急性脑病   急性坏死性脑病  

摘要： 目的探讨儿童流行性感冒病毒(流感病毒)和新型冠状病毒(新冠病毒)相关急性脑病患儿的临床特征,提高儿科医生对本病的认识。方法回顾性分析2021年9月至2023年7月苏州大学附属儿童医院儿童重症监护病房收治的流感病毒和新冠病毒相关急性脑病患儿的临床病历资料。根据救治结果分为存活组和死亡组。对比分析两组患儿的一般情况、临床表现、辅助检查结果及治疗情况。结果一共41例患儿纳入研究。死亡组17例,其中急性坏死性脑病(ANE)15例;男7例,女10例;中位年龄3.50岁;甲型流感病毒感染8例,乙型流感病毒感染3例,新冠病毒感染6例。存活组24例,其中ANE10例;男16例,女8例;中位年龄4.33岁;甲型流感病毒感染14例,乙型流感病毒感染4例,新冠病毒感染6例。死亡组患儿感染前1年内均未接种流感疫苗和新冠病毒疫苗。死亡组17例均有高热和意识障碍,轻咳8例,7例惊厥≥3次,1例惊厥2次,9例仅发作1次,其中癫痫持续状态5例。惊厥前发生谵妄1例。17例首次惊厥发作后(6.50±1.50)h进入昏迷。2例继发肺部感染。9例白细胞介素-6明显升高,17例脑脊液细胞数正常,14例脑脊液蛋白升高。17例均行头颅CT检查,13例表现为双侧丘脑对称性坏死。死亡组均应用激素和丙种球蛋白冲击治疗,11例行连续性肾脏替代治疗,10例鞘内注射地塞米松,2例应用托珠单抗。1例行体外膜肺氧合治疗。8例流感患儿在发热48 h后首次使用神经氨酸酶抑制剂,6例感染新冠病毒的患儿均未使用奈玛特韦/利托那韦抗病毒治疗。15例死于ANE,2例死于继发感染。与存活组比较,死亡组患儿累及脑干、发生休克、格拉斯哥昏迷评分(GCS)低(GCS≤4分)的发生率明显高于存活组(15/17比2/24,χ^(2)=26.18,P<0.001;16/17比5/24,χ^(2)=21.39,P<0.001;14/17比5/24,χ^(2)=15.15,P<0.001)。结论急性脑病以反复抽搐和意识障碍为主要临床特征。流感病毒和新冠病毒感染是主要的病因。头颅影像学检查有助于临床诊断。累及脑干、发生休克和CGS≤4分患儿,其ANE病死率可能更高。

关键词： 变构调节   核糖核酸酶   MAVS   蛋白质复合物   信号传导   无序结构   样受体   衔接蛋白  

摘要： RIG-I样受体(RLRs)下游的抗病毒信号传导,通过一个围绕衔接蛋白“线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)”组织的多蛋白复合物进行。蛋白质复合物的功能可以通过提供变构调节或充当分子导向或支架的RNA分子来调节。研究人员假设RNA在组织MAVS信号平台中发挥作用。经研究发现,MAVS通过其中心固有无序结构域,直接与细胞信使RNAs的3′非翻译区相互作用。通过核糖核酸酶处理消除RNA,会破坏MAVS信号体(包括RNA调节的MAVS互作因子,该互作因子调节RLR信号和病毒限制),并抑制诱导干扰素的转录因子的磷酸化。该研究工作揭示了细胞RNA通过MAVS促进信号传导的功能,并强调了RNA调节控制免疫信号复合物的普遍原理。

关键词： 南极科学考察   生态系统   生命科学学院   大讲堂   北京师范大学   科研工作者  

摘要： 冬去春来40余载,一代代极地科研工作者不惧冰霜雪雨露,一往无前,探索着南极的奥秘,其中一项重要的工作就是探索和保护南极的生态系统。2024年12月28日,中科馆大讲堂邀请到参加了第34次、第35次、第36次南极科学考察的北京师范大学生命科学学院教授。

关键词： 凡纳对虾   白斑综合征病毒(WSSV)   parkin共调基因(PACRG)   parkin基因   SNP  

摘要： 本实验室前期研究中基于全基因组关联分析(GWAS)方法筛选到抗白斑综合征病毒(WSSV)候选基因:parkin共调基因(PACRG)。PACRG与帕金森病相关基因parkin共用一个双向启动子,二者共同参与细胞自噬过程,从而在细胞保护方面发挥作用。本研究对凡纳对虾(Penaeus vannamei)PACRG和parkin在抗WSSV中的功能进行探讨,对其mRNA和氨基酸序列进行特征分析,利用real-timePCR技术检测对虾感染WSSV后不同时间、不同组织中PACRG和parkin的表达水平。通过荧光原位杂交技术(FISH)进行空间定位。利用PCR和Sanger测序技术获得单核苷酸多态性位点(SNP)并进行抗WSSV的关联分析。结果显示,PACRG开放阅读框(ORF)全长600bp,编码199个氨基酸,预测包含一个ParcG结构域。parkinORF序列全长1653bp,编码550个氨基酸,预测包含UBQ、IBR结构域和一个信号肽结构。与多物种进行同源序列比对发现,凡纳对虾PACRG氨基酸序列与日本对虾(Penaeus japonicus)的同源性高达89.70%;凡纳对虾parkin氨基酸序列与中国对虾(Penaeus chinensis)和斑节对虾(Penaeus monodon)的同源性高达93.45%。PACRG和parkin蛋白的保守性较高。感染WSSV后,PACRG和parkin在对虾肝胰腺、鳃、肌肉和眼柄中的表达水平发生显著变化,其中,眼柄中PACRG和parkin表现出极相似的组织表达模式。在肌肉中,PACRGmRNA和WSSV在空间位置上呈现高度重叠状态。结合上述结果,推测PACRG和parkin在凡纳对虾与WSSV的互作中发挥功能。在PACRG中筛选到2个SNP位点,在parkin中筛选到15个SNP位点,其中位于parkin非翻译区(UTR)的5个SNP位点与抗WSSV性状显著相关。本文为研究凡纳对虾抗WSSV的分子机制和抗病分子育种提供了理论依据和参考数据。

关键词： Cripto-1   异体输血   巨噬细胞   免疫抑制  

摘要： 目的 探讨Cripto-1对异体输血诱导巨噬细胞分化后免疫抑制的改善作用。方法 选取BALB/c和C57BL/6小鼠,进行异体输血,培养其巨噬细胞;建立稳定过表达Cripto-1的L02细胞系,与巨噬细胞共培养;Elisa和RT-PCR检测抗炎细胞因子IL-10和促炎细胞因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、转化生长因子β(TGF-β)和IL-1β]的蛋白表达和mRNA水平;蛋白印迹法检测NF-kB通路蛋白表达情况。结果 蛋白印迹检测在实验细胞培养上清液的细胞质中检测到Cripto-1。在L02细胞培养上清液的细胞质中检测到Cripto-1。暴露于Cripto-1上清液8 h或12 h可增加IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平(P<0.05),但TGF-β的mRNA表达水平不升高(P>0.05)。细胞系分泌到上清液中的Cripto-1导致IL-6和IL-10 mRNA表达水平增加(P<0.05)。暴露于这种上清液显著增加了IL-10和TNF-α,IL-6和IL-1β的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),但不影响TGF-β的表达(P>0.05)。Cripto-1处理细胞的核p65水平、ibb激酶(IKB)磷酸化和ibb磷酸化都更高(P<0.05)。抑制NF-kB信号可减少Cripto-1介导的巨噬细胞。结论 Cripto-1通过NF-kB信号通路增强异体输血诱导巨噬细胞吞噬活性,并上调抗和促炎细胞因子的产生。