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关键词： 艾滋病病毒感染者/艾滋病患者   CD4/CD8细胞比值   抗反转录病毒治疗   风险因素  

摘要： 目的了解HIV/AIDS患者c ART后CD4细胞数/CD8细胞数比值(简称CD4/CD8细胞比值)的纵向变化趋势及影响因素。方法以2005年7月至2023年1月在杭州某传染病医院感染科门诊初次进行c ART的HIV/AIDS患者为研究对象,通过问卷及《中国疾病预防控制信息系统》的子系统—传染病报告信息管理系统,收集研究对象基线资料和随访实验室数据,采用Spearman秩相关分析CD4/CD8细胞比值与c ART时间之间的相关性。采用广义线性混合模型(GLMM)分析CD4/CD8细胞比值随时间的变化规律,并分析其影响因素。结果2187例HIV/AIDS患者中,男性2071例(94.7%);初治年龄(33.0±11.0)岁。Spearman秩相关分析显示:随着治疗时间的延长,CD4细胞数(rs=0.340,P<0.001)、CD4/CD8细胞比值(rs=0.415,P<0.001)呈现上升趋势,CD8细胞数(rs=-0.182,P<0.001)呈现下降趋势。广义线性混合模型显示,控制时间效应后,女性(β=0.095,95%CI:0.061~0.129)、初治年龄(β≥60.0岁=0.153,95%CI:0.112~0.193、β30.0~<60岁=0.025,95%CI:0.009~0.041)、吸烟(β=0.062,95%CI:0.045~0.079)、治疗延迟时间≤6个月(β=0.120,95%CI:0.100~0.141)、基线CD4细胞数(β200~349个/μL=0.264,95%CI:0.239~0.289、β350~499个/μL=0.414,95%CI:0.387~0.440、β≥500个/μL=0.535,95%CI:0.505~0.564)和基线VL1×10~5~4.99999×10~5(copies/mL)(β=0.035,95%CI:0.015~0.055)是HIV/AIDS患者CD4/CD8细胞比值恢复的保护因素,文化程度(β高中=-0.048,95%CI:-0.076~-0.019、β大专=-0.078,95%CI:-0.105~-0.051、β本科=-0.104,95%CI:-0.131~-0.078、β研究生及以上=-0.098,95%CI:-0.136~-0.061)、饮酒(β=-0.034,95%CI:-0.050~-0.018)、使用过复方新诺明(β=-0.046,95%CI:-0.075~-0.018)是HIV/AIDS患者CD4/CD8细胞比值恢复的危险因素。结论随着治疗时间延长,CD4/CD8细胞比值呈上升趋势,且与性别、初治年龄、吸烟、饮酒、文化程度、治疗延迟时间、基线CD4细胞数、基线VL、使用过复方新诺明等因素相关。

关键词： 心力衰竭   慢性   社会生态系统理论   心理   应对方式   生活方式   满意度  

摘要： 目的分析基于社会生态系统理论的护理干预对慢性心力衰竭患者心理及行为的改善作用。方法选取2022年2—10月天津市中西医结合医院收治的慢性心力衰竭患者96例,依据简单随机数字表法分为研究组与对照组各48例。对照组采取常规护理,研究组在对照组基础上采取基于社会生态系统理论的护理干预。比较两组应对方式、负性情绪、生活方式和护理满意度的改善情况。结果两组干预后,简易应对方式问卷评分、贝克焦虑量表评分、贝克抑郁量表第2版评分、冠心病自我管理行为量表评分、明尼苏达心力衰竭生活质量问卷评分和欧洲全科医学服务患者满意度量表评分差异均有统计学意义(P<0.05)。结论基于社会生态系统理论的护理干预应用于慢性心力衰竭患者中,可进一步改善其心理状态和行为方式,值得临床推广应用。

关键词： 普氏野马   马疱疹病毒1型   分离与鉴定  

摘要： 为鉴定并分离新疆野马繁殖研究中心疑似发生马鼻肺炎的病原,本研究采集该中心患病马的鼻拭子、血液样品及病变组织,常规处理后经PCR扩增,13份马鼻咽拭子和4份病料样品均获得806 bp的目的条带,将鼻拭子和病变组织研磨液混合后分别接种于RK-13细胞和MDBK细胞盲传3代,每代均出现细胞病变(CPE)。利用PCR扩增出现CPE的细胞培养物中马疱疹病毒1型(EqAHV-1)的gG基因并测序,采用间接ELISA方法对采集的13份血清样品进行EqAHV-l检测,并对EqAHV-l gG基因进行遗传进化分析。将EqAHV-l分别经酸、碱、紫外线、热处理后,接种于RK-13细胞中,测定病毒的半数感染量(TCID_(50));并进一步对分离病毒进行血清中和试验,通过透射电镜鉴定EqAHV-l。结果显示,第3代细胞培养物经PCR扩增获得806 bp的目的条带,与NCBI中登录的EqAHV-l gG基因序列同源性达99.97%;13份血清样品中EqAHV-l抗体阳性率为100%(13/13)。该病毒对强酸、强碱和紫外线敏感,不耐热;EqAHV-l感染RK-13和MDBK细胞的病毒效价分别为10^(4.71)TCID_(50)/0.1 mL和10^(3.48)TCID_(50)/0.1 mL,能被EqAHV-l阳性血清(1:24)中和。该病毒粒子呈直径约120 nm的有囊膜球形结构,与EqAHV-l结构相符。综上所述,本研究分离到新疆普氏野马源EqAHV-l,将其命名为EqAHV-l/PH/China/XJ1/2019株。本研究为进一步研究新疆普氏野马源EqAHV-l的生物学特性奠定基础,为预防该病毒的感染提供数据和技术支持。

关键词： 乙型肝炎病毒   三结构域蛋白29   聚乙二醇干扰素α   信号通路  

摘要： 目的三结构域蛋白29(TRIM29)参与多种疾病的发生和发展,与部分DNA和RNA病毒复制密切相关,本研究对TRIM29与HBV复制及聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)α-2b抗病毒作用之间的关系展开初步讨论。方法选取2021年10月—2022年6月在贵州医科大学附属医院感染内科门诊就诊的CHB患者64例,其中未治疗患者34例(CHB组),经PEG-IFN-α-2b治疗患者30例,体检中心30例健康志愿者作为对照(健康对照组)。收集志愿者年龄、性别、ALT、AST、TBil、DBil、HBV DNA和外周血单个核细胞(PBMC)。采用Hep G2和Hep G2.2.15细胞作为细胞模型,将TRIM29特异性过表达质粒或si RNA和对照转染至细胞;PEG-IFN-α-2b(0、10、100、1000和10000 U/mL)处理Hep G2细胞和Huh7细胞;TRIM29特异性si-RNA或阴性对照联合PEG-IFN-α-2b处理Hep G2.2.15细胞。ELISA检测HBs Ag和HBe Ag的浓度,q RT-PCR检测TRIM29和HBV RNA相对表达水平,Western Blot检测STING、p-TBK1、TBK1、p IRF3、IRF3、MX1和IFIT1蛋白表达情况,免疫共沉淀检测TRIM29与STING蛋白相互作用关系。正态分布的计量资料两组间比较采用成组t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。计数资料两组间比较采用χ2检验或Fisher检验。结果CHB组患者外周血TRIM29表达明显高于健康对照组(P<0.001)。在细胞实验中,HBs Ag、HBe Ag和HBV RNA的表达均随TRIM29表达上调而升高,随TRIM29表达下调而降低(P值均<0.05)。TRIM29与STING互相结合,并通过蛋白酶降解STING,与对照组相比,过表达TRIM29对TBK1和IRF3总蛋白无明显变化,STING、p-TBK1和p-IRF3蛋白表达水平均降低(P值均<0.05)。处理Hep G2细胞和Huh7细胞的PEG-IFN-α-2b浓度越高,TRIM29蛋白和m RNA的表达水平越低(P值均<0.01)。CHB患者在PEG-IFN-α-2b治疗期间,TRIM29 mRNA表达水平逐渐降低,且早期应答组和无应答组间差异均有统计学意义(P值均<0.05)。在等量PEG-IFN-α-2b处理下,与对照相比,敲低TRIM29后Hep G2.2.15细胞的MX1和IFIT1蛋白表达水平明显增高(P值均<0.05)。在PEG-IFN-α-2b治疗早期,CHB患者PBMC中TRIM29表达逐渐降低。结论TRIM29靶向并降解STING,通过抑制STING-TBK1-IRF3信号通路促进HBV复制。TRIM29干扰PEG-IFN-α-2b的抗病毒作用,CHB患者PBMC中TRIM29的表达水平可能作为预测患者对PEG-IFN-α-2b治疗应答的指标。

关键词： 通脉降浊颗粒   动脉粥样硬化   情志失调   细胞凋亡   Bcl-2   BAX   细胞色素C  

摘要： 目的观察通脉降浊颗粒对动脉粥样硬化合并情志失调小鼠细胞凋亡的影响,研究通脉降浊颗粒治疗动脉粥样硬化合并情志失调的作用机制。方法随机将ApoE-/-小鼠分为AS组、AS+CUMS组、通脉降浊颗粒组、阳性药物对照组(辛伐他汀片+圣·约翰草提取物片),每组各6只,采用高脂饲料喂养进行动脉粥样硬化造模,同时除了AS组,其它组给予慢性不可预知应激(CUMS)干预16周。正常对照组选用C57BL/6N型小鼠,给予普通饲料喂养。第9周开始,通脉降浊颗粒组给予通脉降浊颗粒进行灌胃,阳性药物对照组给予辛伐他汀片和圣·约翰草提取物溶液进行灌胃,其余各组给予等量生理盐水进行灌胃,连续灌胃8周。采用糖水偏嗜度及旷场实验观察小鼠行为学改变;HE染色观察主动脉内膜形态学改变;ELISA法检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;Western-blot法检测主动脉组织Bax、Bcl-2、细胞色素c蛋白表达变化。结果与正常组和AS组相比,AS+CUMS组糖水偏嗜度明显下降,旷场实验得分显著降低;与正常对照组相比,模型组(AS组和AS+CUMS组)可见AS斑块形成及大小不等的脂质空泡;与正常对照组相比,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平升高而HDL-C水平下降(P<0.01);与正常对照组相比,模型组Bax蛋白表达显著升高,Bcl-2表达降低,细胞色素c表达升高(P<0.01)。与AS+CUMS组相比,治疗组(通脉降浊颗粒组和阳性药物组)糖水偏嗜度明显增加,旷场实验得分明显提高;与模型组相比,治疗组内斑块面积明显缩小及空泡样脂质沉积明显减少;与模型组相比,治疗组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平降低而HDL-C水平上调(P<0.01);与模型组相比,治疗组Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2表达升高,细胞色素C表达降低(P<0.01)。结论通脉降浊颗粒能通过增加Bcl-2蛋白的表达,抑制细胞色素c的激活,阻止细胞过度凋亡,从而起到治疗动脉粥样硬化合并情志失调的作用。

关键词： 犬细小病毒   犬细小病毒病   宠物临床诊疗  

摘要： 一出现便血症状的患犬综合临床症状以及血常规、C反应蛋白检查、犬细小病毒(CPV)试纸、PCR检查的结果进行诊断,确诊为出血性肠炎型犬细小病毒病。遵循控制感染、对症治疗(补液、止吐、止泻等)、干扰病毒复制、营养支持等治疗原则,患犬经过7 d的治疗,最终恢复健康出院,后期复查各项指标均正常。

关键词： 猪圆环病毒病   猪伪狂犬病   免疫抗体   检测   分析  

摘要： 为协助当地动物防疫站和动物卫生监督所对眉县某猪场猪圆环病毒病(PCVD)和猪伪狂犬病(PR)免疫效果评价与监督检查,采集了该场624份血清样品(其中:哺乳仔猪168份,保育猪169份,后备猪144份,种公猪13份,母猪130份),采用间接ELISA抗体检测。结果显示,猪圆环病毒2型疫苗免疫抗体阳性率在81.66%~95.24%之间,平均为86.70%;猪伪狂犬病基因缺失苗免疫抗体阳性率在94.64%~100.00%之间,平均为98.24%。说明该猪场猪圆环病毒病和猪伪狂犬病免疫抗体阳性合格率均达到了国家有关动物疫病免疫计划规定的要求,免疫整体效果较为理想,但仍应定期抽检疫苗质量,持续优化免疫程序。

关键词： 暖心康   心肌梗死   心肌纤维化   巨噬细胞极化   炎症反应   氧化应激   能量代谢重塑   小鼠   RAW264.7巨噬细胞   HL-1心肌细胞  

摘要： 目的基于巨噬细胞极化调控心肌细胞代谢重塑探讨暖心康(红参、毛冬青)改善心肌梗死小鼠心肌纤维化的机制。方法(1)将C57BL/6J雄性小鼠随机分为3组:假手术组、模型组、暖心康组(1.65 g·kg^(-1)),每组10只。采用结扎冠状动脉术复制心肌梗死小鼠模型。灌胃给药,每日1次,连续4周。采用Masson染色法检测心肌组织纤维化;qPCR法检测心脏组织中LDHA、HK2、CD36、CPT-1A、PPAR-γ、PGC-1α、Ndufa8、SDHd、Cyc1、Cox4i2、CD86、iNOS、TNF-αmRNA表达水平;ELISA法检测血清炎症因子IL-1β的水平。(2)采用脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞向促炎型巨噬细胞极化,制备促炎型巨噬细胞上清液,将其作用于HL-1心肌细胞模型。HL-1心肌细胞分组与RAW264.7巨噬细胞分组相同:空白血清对照组(含5%空白血清+5%胎牛血清的培养基)、暖心康含药血清组(含5%暖心康含药血清+5%胎牛血清的培养基)、脂多糖组(含5%空白血清+5%胎牛血清的培养基+200μg·mL^(-1)脂多糖)和暖心康含药血清+脂多糖组(含5%暖心康含药血清+5%胎牛血清的培养基+200μg·mL^(-1)脂多糖),均干预24 h。采用油红O染色检测心肌细胞中脂质分布情况;DCFH-DA荧光探针检测细胞ROS水平。结果(1)与模型组比较,暖心康组小鼠心脏组织胶原沉积面积显著减少(P<0.01),且梗死区域局部室壁损伤程度减轻;心脏组织中LDHA、HK2、CD36、CPT-1A、PPAR-γ、Ndufa8、SDHd、Cyc1、Cox4i2、CD86、iNOS、TNF-αmRNA表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),PGC-1αmRNA表达水平明显升高(P<0.05);血清IL-1β水平显著降低(P<0.001)。(2)与脂多糖组比较,暖心康含药血清+脂多糖组HL-1心肌细胞胞浆内的脂滴沉积明显减少(P<0.05),ROS水平显著降低(P<0.001)。结论暖心康能够减轻心肌梗死小鼠的心肌纤维化及心室重构,其作用机制可能与抑制促炎型巨噬细胞极化,降低炎症水平,减少ROS生成,降低心脏组织糖酵解水平,改善氧化磷酸化和脂肪酸代谢有关。

关键词： 新型冠状病毒感染   急性黄斑神经视网膜病变   Purtscher样视网膜病变   多发性一过性白点综合征   光相干断层扫描   微视野  

摘要： 目的观察新型冠状病毒感染(COVID-19)相关眼底病变患者的临床特征及疾病转归。方法采用系列病例观察研究设计,纳入2022年12月至2023年2月在郑州大学第一附属医院眼科门诊检查确诊的COVID-19相关眼底病变患者10例18眼。对患眼行最佳矫正视力(BCVA)、眼压、裂隙灯显微镜、扫描激光眼底照相(SLO)、红外眼底照相、光学相干断层扫描(OCT)、视野、微视野检查。明确诊断后根据患者意愿,6例患者口服甲钴胺、长春胺、迈之灵片治疗,4例患者口服甲泼尼龙片治疗,起始剂量每天32 mg,每5 d减4 mg,同时口服氯化钾片、碳酸钙片、奥美拉唑肠溶胶囊。根据患者的急性黄斑神经视网膜病变(AMN)诊断及治疗方案分为AMN糖皮质激素治疗组4例7眼和AMN非糖皮质激素治疗组4例8眼。随访4周,比较治疗前后BCVA、视网膜形态和结构、视网膜敏感度及注视稳定性。结果10例18眼中AMN 9例17眼,其中合并Purtscher样视网膜病变(PLR)1眼,合并急性旁中心中层黄斑病变(PAMM)1眼;多发性一过性白点综合征(MEWDS)1眼。AMN患者SLO图像可见黄斑区中心凹或旁中心凹红褐色不规则病灶,OCT图像可见黄斑中心或旁中心区外丛状层、外核层间呈斑片状强反射,相邻椭圆体带/嵌合体带有不同程度的局部断裂,反射信号紊乱。患眼治疗后4周BCVA较治疗前提升,差异有统计学意义(Z=-2.823,P<0.05)。患眼治疗后4周视网膜敏感度为(26.57±2.24)dB,较治疗前的(24.17±2.73)dB显著提升,差异有统计学意义(t=-11.329,P<0.001)。AMN糖皮质激素治疗组和AMN非糖皮质激素治疗组治疗前和治疗后4周BCVA差值和视网膜敏感度差值比较,差异均无统计学意义(Z=-0.986,P>0.05;t=-1.656,P>0.05)。结论COVID-19相关眼底病变主要表现为AMN、PAMM、PLR、MEWDS等;OCT、微视野等辅助检查可以协助诊断疾病;该疾病引起的视力损害及眼底结构改变在治疗后4周逐渐好转。

关键词： 视网膜色素上皮   去乙酰化酶3   年龄相关性黄斑变性   钙超载   氧化应激  

摘要： 目的探讨去乙酰化酶3(sirtuins 3,SIRT3)在中波紫外线(ultraviolet B,UVB)诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡中的影响及作用机制。方法将人视网膜色素上皮-19(adult retinal pigment epithelial cell line-19,ARPE-19)细胞分别在0(对照)、10、20、30、40、50、60 mJ/cm2强度UVB下照射12 h、24 h,采用4-甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞活性,采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)法分别测定SIRT3蛋白和mRNA的表达水平。将ARPE-19细胞在无血清OPTI-MEM中与空载体+siRNA对照序列(阴性+UVB组)、SIRT3特异性pBABEPuro载体(SIRT3+UVB组)或SIRT3特异性小干扰RNA序列(20 nmol/L siSIRT3+UVB组)孵育,同时加入Lipofectamine RNAiMAX转染试剂,培养24 h后,将阴性+UVB组、siSIRT3+UVB组、SIRT3+UVB组细胞用50 mJ/cm2UVB照射12 h后,继续培养24 h;未经转染处理,但同样经UVB照射的细胞作为UVB组,而未经转染和UVB照射处理的细胞作为空白组。测定细胞中SIRT3蛋白和mRNA的表达水平,采用流式细胞术检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和细胞凋亡;采用CaTM-2/AM探针和Rhod-2/AM探针检测细胞内和线粒体内钙离子(calcium ion,Ca^(2+))浓度。采用RNA测序和基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)确定受SIRT3影响的途径。结果与对照组相比,不同照射强度UVB下ARPE-19细胞处理12 h和24 h后,细胞存活率均下降,差异有统计学意义(P<0.05);且随着UVB照射强度的升高,ARPE-19细胞的存活率呈下降趋势。与对照组相比,不同照射强度UVB下ARPE-19细胞处理12 h后,细胞SIRT3mRNA和蛋白表达水平均下降,除10 mJ/cm2UVB组SIRT3蛋白外,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着UVB照射强度的升高,ARPE-19细胞SIRT3 mRNA和蛋白表达水平均呈下降趋势。与空白组相比,UVB组ARPE-19细胞凋亡率和ROS生成量均增加,差异有统计学意义(P<0.05);然而阴性+UVB组细胞凋亡率和ROS生成量与UVB组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。与阴性+UVB组相比,siSIRT3+UVB组细胞凋亡率和内源性ROS生成量均升高,而SIRT3+UVB组细胞凋亡率和内源性ROS生成量均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白组相比,UVB组ARPE-19细胞浆和线粒体内钙离子浓度均增加,差异有统计学意义(P<0.05);然而阴性+UVB组细胞浆和线粒体内钙离子浓度与UVB组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。与阴性+UVB组相比,siSIRT3+UVB组细胞浆和线粒体内钙离子浓度均升高,而SIRT3+UVB组细胞浆和线粒体内钙离子浓度均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。GESA结果显示,与AMD视网膜形态维持和JAK-STAT级联通路相关的基因在过表达SIRT3的ARPE-19细胞中富集。结论UVB可诱导ARPE-19细胞SIRT3表达下调;而SIRT3过表达后可通过抗氧化作用和维持细胞内Ca^(2+)稳态来保护ARPE-19细胞免受UVB照射诱导的损伤。