关键词:
溶瘤腺病毒
前列腺癌
生物信息学
摘要:
目的构建荷载第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶(PTEN)基因的溶瘤腺病毒验证其在前列腺癌中表达水平及靶向抗肿瘤效果。方法挖掘公开数据库和利用Galaxy在线工具处理本中心去势抵抗性前列腺癌(CRPC)标本基因测序数据, 分析PTEN基因在前列腺癌组织中的表达差异。收集2019年3月至2022年8月徐州医科大学附属医院79例前列腺癌患者的病理样本和临床信息, 免疫组织化学法检测前列腺癌组织及癌旁组织中PTEN蛋白的表达。同源重组法构建溶瘤腺病毒ZD55-PTEN, 细胞计数试剂盒(CCK-8)法、Hoechst-33258和划痕实验检测其靶向抗肿瘤效果。分别采用卡方检验和t检验对定性资料和定量资料进行统计分析, 不满足正态分布的数据采用Mann-WhitneyU检验;Spearman分析PTEN表达水平与临床病理特征的关系。结果前列腺癌组织中PTEN表达水平明显低于癌旁组织, 差异有统计学意义(501例比52例, Z=-19.25, P<0.05);PTEN的mRNA表达水平与淋巴结转移(n=425, r_(s)=-0.98, P<0.05)和Gleason评分(n=497, r_(s)=-1.25, P<0.05)呈负相关。CRPC阶段PTEN缺失明显高于激素敏感性前列腺癌(HSPC)阶段(79例比125例, Z=-0.89, P<0.05)。前列腺癌组织的PTEN蛋白缺失率高于癌旁组织(45.6%比16.5%, t=10.98, P<0.01), 术前血清PSA水平(n=79, r_(s)=-0.47, P<0.01)和术后Gleason评分(n=79, r_(s)=-0.31, P<0.05)与PTEN的表达呈负相关。PTEN缺失的前列腺癌患者, 确诊时PSA水平(36例比43例, χ^(2)=12.22, P<0.05)和根治术后Gleason评分(36例比43例, χ^(2)=6.92, P<0.05)显著高于PTEN蛋白完整患者。成功构建溶瘤腺病毒ZD55-PTEN, ZD55-PTEN组细胞存活率低于对照组[ZD55-EGFP组(49.67±4.19)%、ZD55-PTEN组(29.33±3.84)%, t=8.68, P<0.05];细胞凋亡率高于对照组[PBS组(12.86±5.23)%、ZD55-EGFP组(48.18±4.22)%、ZD55-PTEN组(68.93±5.88)%, t=5.90, P<0.05];划痕愈合率低于对照组[PBS组(79.13±3.98)%、ZD55-EGFP组(61.02±4.73)%、ZD55-PTEN组(47.92±5.97)%, t=6.34, P<0.05]。结论 PTEN基因低表达于前列腺癌组织中, 且具有抑制DU145细胞的增殖、迁移并诱导凋亡的功能。