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关键词： 猪流行性腹泻病毒   S1蛋白   生物信息学   杆状病毒表达   多克隆抗体  

摘要： 以猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S1蛋白为研究对象,构建PEDV S1的杆状病毒系统并稳定表达高纯度的S1蛋白,制备高特异性的S1蛋白多克隆抗体。基于多种基因型PEDV S1基因序列信息,使用生物信息学技术分析其理化特性、跨膜结构域、抗原表位和二级结构等性质。进一步对S1基因序列进行适用于昆虫细胞表达的密码子优化,通过基因合成、载体构建、杆粒转化、细胞培养等步骤,构建适用于表达PEDV S1重组蛋白的Bac-to-Bac杆状病毒表达系统。通过镍柱亲和层析和超滤技术纯化S1重组蛋白,将其与弗氏佐剂混合乳化后免疫BALB/c小鼠,制备鼠多克隆抗血清(多抗血清)。通过间接免疫荧光(IFA)、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(Western Blot)等方法,成功证明了本研究所建立的杆状病毒表达系统能够有效地表达S1重组蛋白。ELISA和IFA验证了所得抗体在特异识别PEDV感染Vero细胞方面的有效性。本文成功构建了PEDV S1的杆状病毒表达系统,稳定表达了高纯度的S1蛋白,并制备了具有高特异性的S1蛋白多克隆抗体,为未来猪流行性腹泻单克隆抗体的制备及检测试剂的研发奠定了基础。

关键词： 环境属性   环境矿物学   光电效应   科研新成果   资源属性   突破性成果   光合作用   理论与应用研究  

摘要： 鲁安怀教授1996年便在《地学前缘》展示采用天然矿物材料治理废水的重要成果。2000年公开发表划时代鸿篇,首次在中文刊物《地学前缘》提出“矿物学不仅具有资源属性,更具有环境属性”的重要学术观点。2015年出版《矿物学环境属性概论》巨著,在推出一系列环境矿物学成果的基础上,系统论述了矿物环境属性及其实用意义。今日爆出矿物光电效应增强植物光合作用突破性成果,实乃功到自然,众望所归。鲁安怀教授深耕环境矿物学30年的成就让众多国内外同行学者肃然起敬。2020年因其在矿物学领域的突出贡献,被国际矿物学界推选为国际矿物学协会(IMA)主席。现如今取得“矿物增强生物光合作用理论与应用研究取得新突破”,可谓潜心多年,成果斐然!

关键词： 自我修复能力   北方农牧交错带   生态系统   环境史学   环境变迁   自然环境   调控能力   过渡地带  

摘要： 在中国的辽阔疆域内存在诸多差异显著的生态系统,在没有极强外力的干扰下,各生态系统通常会保持相对稳定的状态。受此影响,人们会长期从事相同或相似的生业活动,自然和社会景观也较为固定。但生态系统的边缘尤其是两种不同生态系统相邻地带的自我修复能力和调控能力均比较弱,极易导致自然环境发生变异,环境问题在这一地带也出现较多,人类日益频繁的活动也增加了环境变迁与环境问题出现的可能性。

关键词： 吸毒人群   丙型肝炎病毒   影响因素  

摘要： 目的了解上海市宝山区吸毒人群丙型肝炎病毒(HCV)感染状况及影响因素,为加强吸毒人群HCV干预提供依据。方法选择2017—2023年宝山区社会面在管吸毒人群为调查对象,通过吸毒者调查问卷收集人口学信息、吸毒行为、性行为和接受干预服务情况等资料。采集血液标本检测HCV抗体,分析HCV抗体阳性率。采用多因素logistic回归模型分析吸毒人群HCV抗体阳性的影响因素。结果调查2801人,其中男性2233人,占79.72%;女性568人,占20.28%。年龄以40~<60岁为主,1663人占59.37%。HCV抗体阳性率为28.35%,2017—2023年HCV抗体阳性率总体呈上升趋势(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,女性(OR=1.468,95%CI:1.169~1.844)、年龄≥40岁(40~<50岁,OR=2.441,95%CI:1.838~3.242;50~<60岁,OR=2.377,95%CI:1.787~3.161;60~97岁,OR=1.637,95%CI:1.163~2.304)、吸食传统型毒品(OR=2.488,95%CI:1.967~3.147)或混合型毒品(OR=2.950,95%CI:1.974~4.409)、曾经注射过毒品(不共用针具,OR=3.649,95%CI:2.849~4.673;共用针具,OR=3.532,95%CI:1.851~6.738)和近1年与配偶/同居者发生性行为且不使用安全套(OR=1.975,95%CI:1.354~2.879)的吸毒人群HCV抗体阳性率较高;文化程度为高中/中专(OR=0.483,95%CI:0.280~0.835)或大专及以上(OR=0.280,95%CI:0.129~0.608)的吸毒人群HCV抗体阳性率较低。结论2017—2023年宝山区吸毒人群HCV抗体阳性率呈上升趋势,性别、年龄、文化程度、吸食毒品类型、曾经注射过毒品和与配偶/同居者发生性行为时不使用安全套是吸毒人群HCV抗体阳性的影响因素。

关键词： 医学免疫学   课程思政   教学效果   思政元素   Meta分析  

摘要： 检索中文数据库有关医学免疫学课程思政教学的文献,采用CMA软件进行医学免疫学课程思政教学效果的Meta评价,纳入文献34篇、样本量8630人。研究结果表明,大学生对课程思政教学模式满意度显著高于传统教学组(OR=4.26,95%CI:1.98-9.16);课程思政教学模式组学生成绩显著高于传统教学组(SMD=1.33,95%CI:0.57-2.10);92.1%的学生认为课程思政教学模式能提高课程的学习兴趣,且高于传统教学组(OR=7.44,95%CI:1.61-34.5)。87.9%的学生认为课程思政教学模式能促进课程知识的掌握(OR=2.27,95%CI:0.82-6.23);87.9%(95%CI:84.9%~90.3%)的学生认为课程思政教学模式能提高创新能力、思维能力、分析及解决问题能力、自主学习能力,以及团队合作能力;90.0%(95%CI:85.2%~93.4%)的学生认为课程思政教学模式有助于家国情怀、理想信念、伦理道德意识,以及职业素养的培养。医学免疫学课程思政教学模式能显著提高学生的综合能力,能够实现知识传授与价值引领同向同行的协同作用。

关键词： 猪圆环病毒(PCV)   遗传进化   宿主多样性   致病性  

摘要： 猪圆环病毒(Porcine circoviruses, PCV)是目前已知进化速率最快的单链DNA病毒之一,可分为4个基因型(PCV1~PCV4),其中PCV2进化速率达1.2×10^(-3)替代/位点/年,已接近RNA病毒。PCV4是新发现的基因型,与其他PCVs基因组的相似性为43.2%~51.5%。PCV1不具有致病性,其余基因型可感染各年龄段猪,引起具有多种临床表现的免疫抑制相关疾病,已成为制约当代养猪业发展的最重要因素之一。现有研究表明,PCVs不仅在猪群中广泛存在且有高度传染性,在反刍动物、啮齿动物、犬科动物、节肢动物和其他物种中被频繁检测出,具有跨物种传播的风险,需引起高度重视。为更深入地了解PCVs的进化及跨物种传播潜力,笔者总结了PCVs在不同物种中的检出情况及潜在传播途径,为揭示其进化、宿主适应性研究和防控策略提供参考。

关键词： EB病毒   vIL-10   原核表达   GST标签纯化   MC38  

摘要： 目的构建EB病毒vIL-10基因的原核表达载体并纯化vIL-10,进行小鼠实验探究其对MC38肿瘤细胞的作用,为进一步探究vIL-10的在机体内的作用及其机制奠定基础。方法根据vIL-10的DNA序列,设计引物并通过PCR扩增获得vIL-10基因;构建重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1,将重组质粒转化***5α;抗性平板筛选阳性菌落,提取质粒后做PCR、双酶切及测序鉴定;将鉴定正确的重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1转化***3并用氨苄西林筛选、IPTG诱导表达,超声波破碎菌体提取蛋白并做SDS-PAGE、Western blot鉴定;大量培养阳性菌株,破碎菌体后提取蛋白,利用GST标签纯化vIL-10,取少量纯化产物再次做SDS-PAGE、Western blot鉴定;凝血酶切掉GST标签,透析袋除盐、浓缩蛋白后测定蛋白含量,备用;收集MC38细胞,皮下注射6周龄体重相近的野生型、IL-10基因敲除型C57BL/6J小鼠,3周后取成功构建的肿瘤模型小鼠,按400μg/kg肿瘤周围浸润注射vIL-10,每7天注射1次,共注射2次。末次注射7d后处死小鼠,剥离肿瘤称重并记录、分析。结果PCR获得的vIL-10基因大小约为513bp,重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1的PCR、双酶切结果均符合预期,基因测序结果与vIL-10模板序列相符;转化vIL-10-pGEX-4T-1的***3经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳显示与对照组对比可见45ku条带,Western blot显示该蛋白表达成功;阳性菌株经大量培养,提取蛋白后用GST标签进行纯化,Western blot结果显示该蛋白能被特异性纯化,经切割透析浓缩后测定蛋白含量为0.56mg/mL;动物实验结果显示,野生型(C57BL/6J)小鼠注射vIL-10蛋白组比未注射组肿瘤重量明显增加(P<0.05);IL-10基因敲除(IL-10-KO)小鼠注射vIL-10组比未注射组肿瘤重量明显增加(P<0.001)。结论经Western blot鉴定含有重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1的***3能成功表达vIL-10,动物实验表明vIL-10能够促进肿瘤生长。为探究vIL-10对肿瘤的作用研究及其机制奠定了基础。

关键词： 百草枯   衣康酸   肺泡上皮细胞   细胞凋亡   NF-κB信号通路  

摘要： 为探讨衣康酸在百草枯诱导的肺泡上皮细胞凋亡中的作用及潜在分子机制,采用CCK-8、免疫荧光、RT-qPCR及免疫印迹等技术检测细胞凋亡水平和NF-κB信号通路活性.结果显示,衣康酸显著增强了百草枯抑制的人肺泡上皮细胞株BEAS-2B细胞活力(P<0.05),并抑制了百草枯诱导的Cleaved caspase-3蛋白表达.RT-qPCR结果表明,衣康酸显著降低了促凋亡基因Bax mRNA水平,并提高了抗凋亡基因Bcl-2 mRNA水平(P<0.05).此外,衣康酸减少了NF-κB信号通路中P65蛋白的磷酸化.可见,衣康酸对百草枯诱导的BEAS-2B细胞凋亡具有显著抑制作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路中P65的磷酸化相关.

关键词： 轮状病毒性肠炎   五加减正气散   网络药理学   作用机制  

摘要： 目的 运用网络药理学探索五加减正气散治疗轮状病毒性肠炎(RE)的作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、SymMap数据库收集五加减正气散有效化合物,筛选出有效化合物并进行靶点预测;在GeneCards数据库获取RE相关疾病作用靶点;通过Venny 2.1.0软件获取五加减正气散治疗RE的有效靶点并构建蛋白互作网络(PPI);采用Cytoscape 3.8.2软件构建“药物-成分-靶点”网络,然后对网络模块靶点进行基因本体论(GO)富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。结果 五加减正气散中筛选得到有效化合物63个,得到靶点812个,其中作用于RE的靶点41个。KEGG富集分析表明核心靶点主要作用于炎症性肠病(IBD)、Toll样受体信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路。结论五加减正气散可通过调节免疫系统和炎症信号通路达到治疗目的。