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关键词： 乌鳢   弹状病毒   乌鳢水泡病毒   分离   鉴定  

摘要： [目的]明确2021年9月河南省南阳市某乌鳢养殖场乌鳢大量死亡的病原。[方法]本研究通过体表检测、显微观察、细菌分离、PCR检测、序列相似性和系统进化树分析、细胞培养、透射电镜观察、人工感染及病理切片观察等方法进行病原体鉴定。[结果]患病鱼体表无明显机械损伤和出血点,未在患病鱼体表和鳃表面观察到寄生虫的存在,未从患病鱼的组织中分离出致病菌。PCR检测结果显示,患病鱼呈乌鳢水泡病毒(SHVV)阳性。SHVV G基因序列相似性分析显示,分离株与佛山分离株HSHRV-MS2021相似性最高,达99.85%。系统进化树显示,分离毒株与SHVV-2019、SHVV-YL01和HSHRV-MS2021株等聚为同一分支,属于Siniperhavirus属,与HSHRV-MS2021株亲缘关系最近。患病鱼组织匀浆液接种鲤鱼上皮瘤细胞(epithelioma papillosum cyprini cells, EPC)和石斑鱼脾脏细胞(grouper spleen cells, GS)均可引起明显的细胞病变。透射电镜观察发现,病变的EPC细胞内存在大量的子弹状病毒粒子。人工感染试验表明,感染鱼出现与自然患病鱼相似症状,死亡率高达100%。组织切片观察显示,回感患病鱼肠道微绒毛消失,肝脏和脾脏血淋巴增多。[结论]本研究从广东以外地区养殖的乌鳢中分离出1株SHVV,命名为SHVV-NY01,该养殖场乌鳢的大量死亡是由SHVV引起的,本研究结果为该病毒的流行病学调查和防控提供了参考。

关键词： 猫四连接素蛋白   CLEC3B   慢病毒包装系统   真核表达系统  

摘要： 四连接素(Tetranectin)是一种具有结合钙离子和肝素能力的纤溶酶原结合蛋白。通过构建稳定表达猫四连接素蛋白的细胞系,为后续探究其与猫心血管疾病的关系提供实验材料。本研究利用分子克隆技术构建过表达猫四连接素基因的重组慢病毒质粒,并通过慢病毒感染获得过表达猫四连接素蛋白的HEK293T细胞系,蛋白免疫印迹法验证蛋白表达。慢病毒质粒测序结果表明,实测猫四连接素基因CDS序列与NCBI数据库预测序列一致。经嘌呤霉素筛选过表达细胞系构建成功,猫四连接素重组蛋白以可溶形式分泌于细胞上清中,分子量约为25kDa并带有flag标签。

关键词： 肠道病毒   临床特征   重症感染   新生儿  

摘要： 目的 分析新生儿肠道病毒感染的临床特征,探讨抗生素管理改进方案对减少肠道病毒感染患儿抗生素使用的影响。方法 回顾性分析2019年1月至2023年12月新生儿科收治住院的诊断为肠道病毒感染新生儿的临床资料;根据是否合并器官衰竭分为一般感染组和重症感染组,比较两组间患儿临床特征差异。结果 共纳入肠道病毒感染新生儿153例,主要集中在5~7月份;其中男94例、女59例;出生胎龄39.3(38.1~40.3)周,出生体重3 200.0(2 950.0~3 450.0)g;早期新生儿35例;发病日龄15.0(8.0~23.0)天。所有患儿中首发症状为发热146例,病程中出现发热152例,发热病程1.8(1.5~2.4)天。入院中位白细胞计数为5.0(3.5~7.2)×10^(9)/L,中位C反应蛋白水平2.4(0.5~7.3)mg/L;中位降钙素原水平0.2(0.1~0.3)ng/mL。一般感染组146例患儿均好转出院。7例重症感染患儿合并出血肝炎综合征4例,死亡2例;合并心肌炎3例,死亡2例。与一般感染组相比,肠道病毒重症感染组胎龄较小,病程中出现纳差反应差比例较高,血红蛋白、血小板计数较低,乳酸、天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、肌酸激酶MB型同工酶均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。肠道病毒PCR阳性标本进行测序分型共检出9种血清型,其中以柯萨奇病毒B3、埃可病毒12及埃可病毒30型最多见,共占62.7%。实施抗生素管理质量改进后,肠道病毒感染新生儿抗生素使用率较低,抗生素使用时间及住院时间较短,与改进前相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 新生儿肠道病毒感染以轻症为主,但重症感染病死率高;轻、重症患儿在实验室检查结果上存在一定差异。肠道病毒PCR、测序分型及抗生素管理改进措施对合理诊治有帮助。

关键词： 施氮肥   生态系统   群落结构   碳通量  

摘要： 氮素是促进植物生长和发育的重要元素之一,也是限制植物生长的主要元素。本文通过文献综述的形式总结国内外施氮肥对草地生态系统的影响,结果因研究区域、试验期限以及地理环境而异。因此,建议今后多开展施氮肥对不同类型草地生态系统影响的定位试验,长期监测氮输入对生态系统群落结构和生态系统碳通量影响过程,并加强植物和土壤生态系统整合研究。

关键词： 育龄期女性   人乳头瘤病毒   疫苗接种   认知   影响因素  

摘要： 目的:分析育龄期女性人乳头瘤病毒(HPV)疫苗接种认知水平的影响因素。方法:选取2021年12月至2023年12月于安阳市妇幼保健院行妇科检查的180名育龄期女性进行横断面研究。采用安阳市妇幼保健院自制的HPV疫苗接种认知量表评估HPV疫苗接种认知水平,根据其HPV疫苗接种认知水平分为认知良好组和认知不良组。收集育龄期女性的一般资料,采用Logistic回归分析影响育龄期女性HPV疫苗接种认知水平的因素。结果:180名育龄期女性中,HPV疫苗接种认知良好159名,占88.33%,设为认知良好组,HPV疫苗接种认知不良21名,占11.67%,设为认知不良组;两组年龄、吸烟史、饮酒史、基础疾病、孕次、婚姻状况、性生活频次、体质量指数等比较,差异均无统计学意义(P>0.05);认知不良组受教育程度为初中及以下、家庭月收入水平<3000元、居住环境为农村、肄业等占比均高于认知良好组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析结果显示,受教育程度初中及以下、家庭月收入水平<3000元、居住环境为农村、肄业等均为影响育龄期女性HPV疫苗接种认知不良的危险因素(OR>1,P<0.05)。结论:受教育程度初中及以下、家庭月收入水平<3000元、居住环境为农村、肄业等均为影响育龄期女性HPV疫苗接种认知不良的危险因素。

关键词： arginine-glycine-aspartic peptide(RGD)   epidermal growth factor receptor interference peptide(EGFRi)   momordica antiviral protein(MAP30)   MDA-MB-231 cell   tumor targeting   apoptosis  

摘要： Momordica antiviral protein 30 kD(MAP30)is a type I ribosome-inactivating protein(RIP)with antibacterial,anti-HIV and antitumor activities but lacks the ability to target tumor *** increase its tumor-targeting ability,the arginine-glycine-aspartic(RGD)peptide and the epidermal growth factor receptor interference(EGFRi)peptide were fused with MAP30,which was named *** efficiency of targeted therapy for triple-negative breast cancer(TNBC)MDA-MB-231 cells,which lack the expression of estrogen receptor(ER),Progesterone receptor(PgR)and human epidermal growth factor receptor-2(HER2),is *** this study,we focus on exploring the effect and mechanism of ELRL-MAP30 on TNBC MDA-MB-231 ***,we discovered that ELRL-MAP30 significantly inhibited the migration and invasion of MDA-MB-231 cells and induced MDA-MB-231 cell ***,ELRL-MAP30 treatment resulted in a significant increase in Bax expression and a decrease in Bcl-2 ***,ELRL-MAP30 triggered apoptosis via the Fak/EGFR/Erk and Ilk/Akt signaling *** addition,recombinant ELRL-MAP30 can inhibit chicken embryonic angiogenesis,and also inhibit the tube formation ability of human umbilical vein endothelial cells(HUVECs),indicating its potential therapeutic effects on tumor ***,these results indicate that ELRL-MAP30 has significant tumor-targeting properties in MDA-MB-231 cancer cells and reveals potential therapeutic effects on *** findings indicate the potential role of ELRL-MAP30 in the targeted treatment of the TNBC cell line MDA-MB-231.

关键词： 综合生态系统服务   时空变化   InVEST模型   地理探测器   大汶河流域  

摘要： 探究生态系统服务的时空变化并识别主要驱动因素,对流域生态系统的保护和利用具有重要意义。采用InVEST模型从生境质量、产水量、碳储量和土壤保持等4方面对2000—2020年大汶河流域生态系统服务进行综合评价,利用Pearson系数和地理探测器探究生态系统服务间的权衡/协同关系及驱动机制。结果表明:(1)大汶河流域土地利用类型以耕地和建设用地为主,建设用地呈增加趋势,草地呈减少趋势;(2)综合生态系统服务变化较小,空间异质性明显,高值主要分布在北部泰山、中部徂徕山以及东部新泰新甫山;(3)生境质量呈变差趋势,产水量呈增加趋势,碳储量基本保持稳定,土壤保持则先减少后增加,产水量与碳储量呈权衡关系,其余生态系统服务间呈协同关系;(4)综合生态系统服务主要受年平均温度、高程和年降水量等自然环境因素的影响,受人口密度和GDP等经济社会因素影响较小。

关键词： 番茄   番茄黄花曲叶病   一氧化氮   抗氧化酶基因  

摘要： 为探究番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)胁迫下外源一氧化碳(nitric oxide,NO)对番茄抗氧化物酶基因表达的影响,以易感病番茄品种金鹏1号为试验材料,在对照(CK)、TYLCV(TY)和NO+TYLCV(NO+TY)3种处理下,通过转录组测序、荧光qRT-PCR和生物信息学分析进行研究。结果表明,在番茄基因组中共筛选出55个抗氧化酶相关编码基因,其中存在于不同亚细胞区室中含有外显子数目最多的抗氧化酶基因均显著响应TYLCV胁迫。NO介导的抗氧化酶编码基因数量在不同亚细胞区室的分布表现为叶绿体>细胞膜>细胞质>过氧化物酶体>液泡,其中Chl Cu-Zn SOD、Chl MR2、Chl GR、Per MR、Pla CAT1和Pla CAT7的表达量显著上调;Chl Fe SOD1、Chl Fe SOD2、Cyt GPX、Cyt APX1、Cyt APX2 L-5、Pla CAT3、Pla CAT8和Vac CAT的表达量显著下调。实时荧光qRT-PCR验证发现,Chl GR、Min Mn SOD和Per CAT2响应TYLCV表达,Chl Cu-Zn SOD、Pla CAT7、Pla CAT8和Cyt APX2 L-5响应TYLCV和NO表达。以上结果为研究NO在提高番茄抗病性机制中的作用提供理论依据。

关键词： 脊柱关节疼痛   新型冠状病毒感染   三痹汤   蠲痹汤   身痛逐瘀汤   谢林   验案  

摘要： 新型冠状病毒(以下简称新冠病毒)感染经治疗康复后,部分患者仍会遗留不同程度脊柱关节痛。谢林教授指出辨治新冠病毒感染后脊柱关节疼痛的核心在于“审虚实,理寒湿,通血络,止痹痛”,补虚祛实,虚实兼杂者补泻兼施。寒湿疫邪外袭,气血瘀滞者治以三痹汤加减;平素体虚,疫毒侵袭,虚实兼夹者宜选蠲痹汤加减;夙疾而痰瘀留伏,病后初愈,又感疫毒者,当予身痛逐瘀汤加减。

关键词： 厌氧氨氧化   污泥形态   微生物群落   共生网络   PICRUSt2软件  

摘要： 为深入理解厌氧氨氧化系统沿程微生物群落特征,考察了长期运行的升流式厌氧污泥床(UASB)厌氧氨氧化系统沿程方向上不同形态污泥微生物群落多样性、结构、物种网络及功能特征.结果表明,厌氧氨氧化系统沿程方向上不同形态污泥An AOB基因丰度存在显著差异(P<0.05),底部颗粒污泥(KL)中An AOB基因丰度为2.12×1010copies/gVSS,显著高于系统沿程其它形态污泥(P<0.05);沿程方向上不同形态污泥微生物多样性存在显著差异(P<0.05),但未呈现出明显的变化规律.不同形态污泥优势菌门(相对丰度>1%)为绿弯菌门(Chloroflexi)、浮霉菌门(Planctomycetota)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidota)、酸杆菌门(Acidobacteriota)和放线菌门(Actinobacteriota),相对丰度排名前10的菌属为norank_f__norank_o__SBR1031、Candidatus_Kuenenia、norank_f__Anaerolineaceae、Nitrosomonas、Limnobacter、norank_f__PHOS-HE36、Denitratisoma、Denitratisoma和OLB13norank_f__A4b,相对丰度在不同样品间存在显著差异(P<0.05);沿程方向不同形态污泥微生物群落结构间存在显著差异(P=0.001).网络分析发现,不同形态污泥微生物网络结构和拓扑性质存在差异,其中沉淀池内絮状泥(CD)、出水管内生物膜(XK)的平均度和中心紧密度高于沿程其他样品,微生物群落间具有更紧密的关联性.PICRUSt2分析发现,与代谢相关的通路功能基因丰度明显大于其他功能基因丰度,并且沿程不同形态污泥间代谢功能基因丰度存在显著差异(P<0.05),氮素代谢功能基因hao相对丰度远高于norB,同时narG基因丰度是nirS丰度的20.8~733.9倍,系统内部分亚硝化和部分反硝化功能活跃.厌氧氨氧化系统沿程方向上不同形态污泥微生物群落存在明显的异质性特征,但未呈现出明显的规律性.