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关键词： 新农科   动物组织与胚胎学   混合式教学   金课建设   过程化考核  

摘要： 在新农科视域下,以培养具有爱国情怀、科学精神及“三农”情怀的创新型农业人才和高素质的兽医科技人才为目标,中国农业大学“动物组织与胚胎学”教学团队进行系列教学改革,包括教学内容与考核方式改革,慕课制作,配套教材建设,线上线下混合式教学模式设计并予以实践。教学中将德育教育与专业知识深度融合,构建以“课程思政”为引领、以“厚基础、重实践、强能力、富情怀”为教学理念的“多位一体”的课程教学体系,打造“时空融合+多维互动”的教学范式,使得动物组织与胚胎学课程的教学质量得到全面提升。通过专家督导评价、学生问卷调查等多种途径反馈,表明该混合式课程建设卓有成效,在实践中收到很好的教学效果。

关键词： 碱性成纤维细胞生长因子   三七总皂苷   骨髓间充质干细胞   心肌细胞   心肌梗死   PI3K/Akt通路  

摘要： 目的探究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibro-blast growth factor,FGF-2)和三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)单独或联合诱导对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向心肌细胞(cardiomyocytes,CMs)分化的影响以及PNS和FGF-2促分化的作用机制。方法全骨髓贴壁法分离20~30 g 3周龄SD大鼠的骨髓间充质干细胞,通过流式细胞术鉴定骨髓间充质干细胞的纯度。鉴定纯度合格后通过PNS和FGF-2单独或联合诱导以及PNS和FGF-2分别与LY294002(phosphatidylinositol 3 kinase抑制剂)联用诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化。根据培养的相应时间点,分为对照组、三七总皂苷组(PNS组)、碱性成纤维细胞生长因子组(FGF-2组)、三七总皂苷+碱性成纤维细胞生长因子组(PNS+FGF-2组)。通过免疫组织化学检测诱导后Desmin和Cx43的表达水平;Western blot检测心肌特异性蛋白、有关通路蛋白及细胞凋亡有关蛋白的表达水平;采用RT-qPCR检测心肌转录因子表达水平。结果各单独诱导组(FGF-2组、PNS组)或联合诱导组(PNS+FGF-2组)均提高心肌特异性蛋白和基因表达水平(P<0.05),且最高表达水平出现在联合组。PNS和FGF-2分别与LY294002联用,相较于两单独诱导组降低了心肌特异性蛋白和基因的表达水平,降低通路相关蛋白Akt的磷酸化水平,且Bcl-2水平降低,Bax水平升高,Bcl-2/Bax比值减小(P<0.05)。结论PNS和FGF-2均可使骨髓间充质干细胞诱导后向心肌细胞定向分化,且二者的联合诱导是一种更高效的诱导方法。PI3K/Akt信号通路参与了PNS和FGF-2促进骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的过程,且PNS和FGF-2起到减少细胞凋亡的作用。

关键词： 办刊宗旨   科研成果   公众科学素养   交叉学科领域   国内外食品   慢性疾病   免疫学   营养学  

摘要： 办刊宗旨:传播国内外食品科学、营养学、免疫学及其交叉学科领域内具有较强创新性和影响力的科研成果,提升公众科学素养和健康饮食理念,促进慢性疾病预防。

关键词： 黑色素瘤   干扰素-γ   PI3K/AKT/mTOR信号通路   细胞侵袭   细胞迁移   细胞凋亡   移植瘤  

摘要： 目的:探讨干扰素-γ(INF-γ)对黑色素瘤细胞的影响及作用机制。方法:选取人黑色素瘤细胞A375,分为对照组(空白未处理)、INF-γ低剂量组(加入INF-γ10μg/L)、中剂量组(加入INF-γ50μg/L)、高剂量组(加入INF-γ100μg/L)。采用CCK-8法检测A375细胞存活情况。采用流式细胞术检测A375细胞凋亡情况。采用Transwell实验检测A375细胞侵袭能力。采用细胞划痕实验检测A375细胞迁移能力。采用Western blot检测A375细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白表达。根据细胞分组,将BALB/c裸鼠也相应随机分为4组,每组8只,建立裸鼠皮下移植瘤模型。比较各组裸鼠不同时间皮下移植瘤体积。结果:与对照组比较,INF-γ低、中、高剂量组A375细胞存活率(24、48、72 h)、迁移率、细胞侵袭数、裸鼠皮下移植瘤体积(7、14、21、28 d)以及p-PI3K、p-AKT、mTOR蛋白表达水平依次降低,细胞凋亡率依次升高(均P<0.05)。结论:INF-γ可通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制黑色素瘤细胞侵袭、迁移以及裸鼠皮下成瘤速度,并诱导细胞凋亡。

关键词： 肠易激综合征   微小RNA-219a-5p   微小RNA-338-3p   肠道微生物   炎症指标  

摘要： 目的 探讨肠易激综合征（IBS）患者血清微小RNA-219a-5p（miR-219a-5p）和微小RNA-338-3p（miR-338-3p）水平与肠道微生物及炎症因子水平的相关性。方法 选取2019年10月至2022年10月湖北民族大学附属民大医院收治的90例IBS患者作为观察组，另选取同期在该院体检的90例健康者作为对照组。比较两组血清miR-219a-5p和miR-338-3p水平、肠道微生物数量及炎症因子[高敏C-反应蛋白（hs-CRP）、白细胞计数（WBC）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6（IL-6）、IL-1α、IL-1β、IL-10]水平。采用Pearson相关分析IBS患者血清miR-219a-5p、miR-338-3p水平与肠道微生物数量及炎症因子水平的相关性。采用Spearman相关分析miR-219a-5p、miR-338-3p水平与Chaol指数的相关性。结果 观察组血清miR-219a-5p、miR-338-3p水平明显低于对照组（P＜0.05）观察组双歧杆菌、乳酸杆菌数量低于对照组，大肠杆菌、链球菌数量高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。观察组hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1α、IL-1β、WBC水平高于对照组，IL-10水平低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关性分析结果显示，IBS患者血清miR-219a-5p、miR-338-3p水平与双歧杆菌、乳酸杆菌数量及IL-10水平均呈正相关（P＜0.05），与大肠杆菌、链球菌数量及hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1α、IL-1β、WBC水平均呈负相关（P＜0.05）。Spearman相关性分析结果显示，血清miR-219a-5p、miR-338-3p水平与Chaol指数均呈负相关（P＜0.05）。结论 IBS患者血清miR-219a-5p、miR-338-3p水平与肠道微生物数量及炎症因子水平有相关性，可能成为IBS诊断和治疗的血清指标。

关键词： 柠檬醛   NCI-H1975   表皮生长因子受体   细胞增殖   细胞凋亡  

摘要： 该文探究柠檬醛是否通过表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)信号通路诱导非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)系中NCI-H1975细胞增殖。主要采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞毒性、流式细胞术检测细胞凋亡率、分子对接探究柠檬醛与EGFR蛋白结合位点,通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测柠檬醛对EGFR及其下游细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)蛋白表达的影响。研究结果显示柠檬醛在NCI-H1975细胞系上IC50值为114.5μmol/L,且100μmol/L的柠檬醛已对NCIH1975细胞的增殖产生显著抑制作用(P<0.05),呈浓度依赖性抑制细胞增殖;流式结果显示柠檬醛可增大细胞凋亡率,促进细胞凋亡;Western Blot检测结果表明,柠檬醛在100μmol/L时对EGFR/ERK蛋白磷酸化表达有显著抑制作用(P<0.05)。综上,柠檬醛可抑制NCI-H1975细胞增殖并能促进凋亡,通过抑制EGFR信号通路传导进而发挥作用。

关键词： 牛冠状病毒(BCoV)   全基因组   宏病毒组   S基因   遗传进化  

摘要： 【目的】了解内蒙古地区牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)流行毒株的全基因组特征和遗传进化情况,为有效防控BCoV感染提供参考。【方法】本研究对疑似感染BCoV的犊牛脾脏进行宏病毒组测序和步移RT-PCR扩增,获得BCoV全基因组序列,并对其进行生物信息和遗传进化分析。利用Oligo 7.0软件设计特异性引物扩增S基因,并对其进行遗传进化、氨基酸序列变异、抗原表位预测及三级结构预测分析。【结果】本研究从疑似感染BCoV的犊牛脾脏中成功获得大小为30971 bp的BCoV全基因组序列,NCBI登录号为PP352170.1,该全基因组核苷酸序列与BCoV爱尔兰株ABGEB0-62相似性最高,为99.2%,并与该株亲缘关系最近,同时与BCoV法国株BCoV_2014_13和挪威株Nes_2012-01-03属于同一进化分支;扩增出的S基因核苷酸长度为4092 bp,与BCoV爱尔兰株ABGEB0-62 S基因序列亲缘关系最近,处于同一进化分支,但核苷酸序列与BCoV内蒙古株NMG1 S基因相似性最高,为99.4%;S基因编码的氨基酸与Mebus株比对发现,有15个氨基酸变异位点(S1亚基12个,S2亚基有3个),其中变异的氨基酸残基154、260、499-520、718、1192、1344位氨基酸处于抗原表位区,并导致S蛋白三级结构发生改变。【结论】本研究利用宏病毒组测序和基因组5′-端步移RT-PCR法获得内蒙古BCoV株全基因组序列,其S蛋白抗原表位区氨基酸位点发生变异和三级结构改变,预示S蛋白抗原性发生了改变;S1亚基的多态性区域氨基酸位点的变异预示S蛋白的致病性发生变化。

关键词： 传染性法氏囊病   VP 2基因   分子流行病学调查   遗传进化分析   鸡  

摘要： 近年来,由传染性法氏囊病病毒(IBDV)变异株引起的非典型传染性法氏囊病(IBD)给我国养禽业带来了新的威胁。为了解IBDV变异株流行规律,对2022年全国范围内的3000份疑似IBD样品进行分子流行病学调查,结果表明16.9%(507/3000)检测为IBDV阳性,随机选择354份阳性样本进行基因型鉴定,变异株占比达89.0%(315/354)。选择5株代表毒株VP2基因进行遗传进化分析,结果表明代表毒株与国内外流行变异毒株处于同一遗传进化分支,与新型变异株SHG19的氨基酸同源性高达98.9%~99.3%;且FJ220325-1毒株氨基酸关键位点在七肽区326位由丝氨酸变异为亮氨酸,提示IBD流行特征正在发生变化,但抗原性及毒力是否发生变化需要进一步验证。研究丰富了IBDV变异株的流行病学数据,可为做好相关防控工作提供理论参考。

关键词： 虚拟仿真方法   医学免疫学   实验教学  

摘要： 医学免疫学实验不仅是对理论知识的验证,更是对其的巩固与拓展。虚拟仿真实验方法已成为医学教育发展的重要方向,成为医学免疫学实验教学的主要手段。文章分析了传统医学免疫学实验教学模式存在的不足及建设虚拟仿真实验平台的必要性,详细阐述了虚拟仿真实验平台的建设及其在中医药院校医学免疫学实验教学中的具体应用,以期为中医药院校医学免疫学实验教学提供参考。

关键词： 塔玛亚历山大藻   氮浓度   氮代谢酶   赤潮   富营养化   生长   光合作用  

摘要： 针对近二十年中国高氮磷比海域中亚历山大藻等甲藻引起的赤潮现象频发、规模和范围显著扩大的问题,本研究以塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)为实验材料,在不同氮浓度下对***进行一次性培养,系统分析了氮浓度对***生长生理的影响。结果显示:在缺乏氮源的情况下,***的生长受到明显抑制,然而随着氮浓度的逐渐增加,其生长速率加快且叶绿素含量增高,从而其光合作用能力也显著增强;在对数生长期,与高氮培养相比,低氮培养条件下***的硝酸还原酶(Nitrate reductase NR)和谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)活性升高,而平台期NR和GS活性则是随氮浓度的升高而升高;脲酶(Urea enzymes,UE)活性在各时期均随氮浓度的升高而呈现先升高后降低的趋势。综上结果表明:不同氮浓度对***生长生理存在显著影响,相较于低氮培养,***更适应于高氮环境下生长;***通过调节氮代谢酶活性以应对氮限制不利环境的影响,这种适应能力使其在面对复杂多变的无机氮条件下更具竞争优势。这些研究结果可为解释氮源影响近岸水域生态系统中甲藻赤潮动态提供一定依据。