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关键词： 卷积神经网络   注意力机制   精准农业   蜜源识别分类   数据集融合  

摘要： 目的:针对蜜源植物种类繁多及其复杂的外观特征，提出一种高效且准确的识别和分类方法，旨在提升蜜蜂授粉活动的生态效益以及蜂蜜生产的质量和效率。方法:提出一种使用改进版轻量化模型MobileNet V3进行蜜源植物识别和分类的方法。通过数据融合的方式扩展数据集，结合ECA机制优化通道间的特征权重分配，同时引入Mish激活函数以改善模型的非线性特性，提升蜜源植物的识别准确性。结果:改进后的模型识别准确率由原模型的89.59%提升至94.20%，精确度从89.9%提升至94.5%，改进后的模型体积由原来的16 MB优化至10 MB，展现了更为出色的性能与效率。结论:提出的改进方法显著提高了蜜源植物识别的准确性和效率并减少了存储和计算资源的占用，对精准农业和蜂蜜生产具有重要的实际应用价值。

关键词： 土地利用变化   生态系统服务   雄安新区   生态文明建设  

摘要： 自雄安新区设立后，人口的快速增加和高强度的土地利用变化对当地生态环境影响显著。为此，论文基于10米2017—2021年逐年土地利用数据，探究雄安新区土地利用动态变化。依据《中国生态系统单位面积生态服务价值当量表》，结合社会经济发展水平加以修正，评估土地利用变化对生态系统服务价值的影响。结果表明：（1）2017—2021年，雄安新区土地利用变化显著，以耕地向林地、建设用地、水域和湿地的转化为主要特征。（2）得益于“千年秀林”“退耕还淀”等生态工程，生态系统服务价值由36.97亿元增至45.56亿元，增长率达25.96%，生态效益显著提升。（3）除食物生产服务外，其余单项生态系统服务价值均呈增加趋势。食物生产服务价值系数最高的耕地的大量减少，是造成这一现象的主要原因。因此，建议强化规划引导，加快提升生态系统服务价值，提高耕地单产水平，关注失地农民生计可持续问题。

关键词： 鸽圆环病毒   Cap基因   荧光定量PCR   分子流行病学   遗传演化分析  

摘要： 为实现对鸽圆环病毒（pigeon circovirus，PiCV）的快速检测，建立了针对Cap基因的PiCV荧光定量PCR检测方法，并应用该方法进行PiCV分子流行病学调查。本研究针对PiCV核衣壳蛋白Cap基因的保守序列设计一对特异性引物，并通过条件优化，成功建立了荧光定量PCR检测方法。此外，还对该方法的灵敏度、特异性、重复性进行了全面评估。利用建立的荧光定量PCR方法对华北和西北部分地区147份临床样本进行检测，并对阳性代表样本的Cap全长序列进行遗传演化分析。结果表明，所建立的荧光定量PCR方法在1×104至1×108拷贝·μL-1范围内显示出良好的线性关系，最低检测限达到1×101拷贝·μL-1，显著高于传统PCR方法。此方法具有良好的重复性，且不与其他常见鸽病病原产生交叉反应。采用本试验方法检测的147份华北和西北部分地区肉鸽和信鸽临床样本PiCV阳性率为85.0%，阳性样本的Cap全长序列分析及遗传演化分析结果显示，6株分离株同源性在89.8%～97.5%之间，与PiCVHeBeiTS2021株在同一个分支，亲缘关系较近。建立的PiCV荧光定量PCR方法具备灵敏、特异和稳定等优点，可用于PiCV的快速检测，同时流行病学调查结果表明，2022—2023年华北和西北部分地区PiCV感染率较高，为我国PiCV的防控研究提供数据支撑。

关键词： 高致病性禽流感病毒   H5亚型   遗传进化   传播  

摘要： 目的 基于H5亚型高致病性禽流感病毒2.***.4.4b分支全球蔓延现状，分析2010—2023年中国H5亚型2.***.4.4b分支病毒传播流行和系统发育进化特征。方法 收集整理2010—2023年全球流感共享数据库中H5亚型2.***.4.4b分支病毒HA基因序列，结合病毒的宿主来源、采样时间和地理分布等元数据信息，基于最大似然法构建系统发育树，利用谱系生物地理学推断病毒传播路径，分析中国H5亚型2.***.4.4b分支病毒的宿主来源、时空传播和遗传进化特征。结果 2010—2023年中国野生水禽、家禽中存在H5N1、H5N6和H5N8亚型的高致病性禽流感病毒共流行，不同亚型的宿主来源存在差异；H5N1和H5N8亚型主要为野生水禽来源，H5N6亚型主要为家禽来源。遗传进化分析显示，H5亚型2.***.4.4b分支根据进化时间形成明显的3个簇，即cluster I、II和III，与全球3次疫情的流行趋势相一致。谱系发育地理分析显示，华中地区是中国H5亚型2.***.4.4b分支病毒传播和进化的驱动中心。结论 2010—2023年H5亚型2.***.4.4b分支病毒在中国持续流行，通过野鸟迁徙、禽类交易等有输入的高风险，中国应持续开展人群、家禽、野生水禽等全方位的流感监测预警。本研究为中国H5亚型高致病性禽流感病毒的风险评估提供了依据。

关键词： 黎药海南地不容   氧化克班宁   肝癌细胞   细胞凋亡   细胞自噬  

摘要： 研究海南地不容抗肝癌活性成分氧化克班宁，抑制肝癌细胞增殖的具体机制。首先以噻唑蓝（MTT）法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记、平板克隆法探究氧化克班宁是否造成HepG2和Hep3B2.1-7细胞增殖的抑制，经碘化丙啶（PI）单染观察氧化克班宁诱导HepG2和Hep3B2.1-7细胞凋亡，并以Western blot法验证凋亡效应蛋白半胱氨酸蛋白酶蛋白-3（c-caspase-3）、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1（PARP1）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Bcl-2同源杀手蛋白（Bak）和髓样细胞白血病1（Mcl-1）是否参与凋亡过程。其次氧化克班宁与自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）同时作用于HepG2细胞，检测细胞自噬标记物LC3和自噬相关蛋白真核翻译起始因子4E结合蛋白1（4EBP1）、磷酸化真核翻译起始因子4E结合蛋白1（p-4EBP1）、核糖体蛋白S6激酶（P70S6K）、磷酸化核糖体蛋白S6激酶（p-P70S6K）的变化。MTT法、BrdU标记、平板克隆法检测结果均显示，氧化克班宁可抑制HepG2和Hep3B2.1-7细胞增殖，且呈剂量依赖性。流式细胞术检测结果显示，氧化克班宁作用后，HepG2和Hep3B2.1-7细胞凋亡率显著升高。Western blot结果显示，氧化克班宁作用于HepG2细胞后，可上调c-caspase-3、Bax、Bak蛋白表达，下调PARP1、Bcl-2、Mcl-1蛋白表达，表明氧化克班宁可引发肝癌细胞凋亡，进而抑制肝癌细胞增殖；氧化克班宁促使细胞自噬标记物LC3-I向LC3-II转化，降低4EBP1、P70S6K蛋白的磷酸化水平，自噬抑制剂3-MA可逆转此过程，表明氧化克班宁可通过诱导细胞自噬达到抑制肝癌细胞增殖作用。综上所述，氧化克班宁可通过诱导肝癌细胞凋亡和细胞自噬，进而抑制其细胞增殖。

关键词： 鹿科动物   病毒感染   病毒检测  

摘要： 鹿科动物是极为丰富的动物类群，目前共包括4个亚科、16个属、几十个不同种类，广泛分布南北半球。牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、鹿流行性出血病病毒（EHDV）、口蹄疫病毒（FMDV）等是常见感染鹿科动物的病毒。这些病毒有广泛的宿主范围以及感染途径，如跨种传播、虫媒传播等，并引发呼吸系统、消化系统、生殖系统等方面的症状，而鹿作为重要的经济动物，这些易感病毒不仅给野生动物资源产生影响，也为畜牧业带来经济损失。本文将重点探讨这些鹿科动物易感病毒，以及病毒感染后所表现的症状及检测方法，为加强鹿科动物的病毒防控提供参考依据。

关键词： 禽流感   外环境   污染   监测  

摘要： 目的 分析广东省珠海市禽流感病毒外环境样本的污染状况,以更好地评估其对公共卫生的潜在威胁,并采取相应的预防措施。方法 2020—2023年,随机抽取珠海市居民农贸市场和禽类批发市场,采集外环境样本。样本通过荧光定量Real-time PCR技术进行通用A型禽流感病毒的核酸检测和H5、H7和H9亚型检测工作。结果 共采集外环境样本2 730份,检出通用A型禽流感病毒核酸阳性样本635份,阳性率为23.26%。A型禽流感病毒检出率11月至次年5月较高。H9亚型检出率最高为17.22%,H5亚型检出率为1.28%,H7亚型检出率为0.95%（χ2=159.397,P<0.001）。居民农贸市场样本阳性检出率为24.91%,高于活禽批发市场（χ2=24.237,P<0.001）;秤盘的物表样本阳性检出率为32.89%,高于其他类型样本（χ2=73.972,P<0.001）。结论 珠海市外环境样本中存在禽流感病毒污染,居民农贸市场禽流感病毒感染风险高。应强化对居民农贸市场外部环境的消毒工作。

关键词： 溃疡性结肠炎   新乌梅丸   na?ve CD4   T细胞   糖酵解   免疫机制  

摘要： 目的 研究新乌梅丸对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）患者na?ve CD4+T细胞的影响。方法 使用SPF级雄性SD大鼠30只制备新乌梅丸含药血清;构建na?ve CD4+T细胞体外分化模型;CCK-8法筛选新乌梅丸含药血清干预na?ve CD4+T细胞的适宜浓度;使用流式细胞术检测na?ve CD4+T细胞纯度及含药血清对分化模型的影响;通过ELISA法检测细胞上清液白介素（interleukin,IL）-17 A、IL-10细胞因子表达量,RT-qPCR检测葡萄糖转运蛋白1和糖酵解关键酶（HK2、PKM2、LDHA）的mRNA表达。结果 本研究提取了纯度为98.2%的na?ve CD4+T细胞,并以此为基础构建了CD4+T细胞体外分化模型。CCK-8法筛选新乌梅丸含药血清干预na?ve CD4+T细胞的适宜浓度为2.5%、5%、10%。与模型组相比,经新乌梅丸干预后,na?ve CD4+T细胞向Th17细胞的分化明显减少（P<0.01）,而向Treg分化明显升高（P<0.05）。机制方面,与模型组相比,经新乌梅丸干预后,葡萄糖转运蛋白1及糖酵解相关酶（HK2、PKM2、LDHA）的基因水平均明显下降（P<0.05）。结论 新乌梅丸可能通过抑制na?ve CD4+T细胞的糖酵解途径,从而调控其分化,恢复Th17/Treg免疫平衡,达到治疗UC的目的。

关键词： 心肌再灌注损伤   细胞低氧   心肌   微RNAS   细胞凋亡   氧化性应激   根皮苷   miR-125a-5p  

摘要： 目的 探讨根皮苷对缺氧/复氧（H/R）诱导的大鼠心肌细胞H9C2凋亡和氧化应激的影响及可能机制。方法体外培养H9C2细胞，用16、32、64μmol/L根皮苷预处理或转染anti-miR-125a-5p、anti-miR-NC、miR-125a-5p模拟物、模拟物阴性对照后建立H/R模型。CCK-8法测定细胞增殖，流式细胞术评估细胞凋亡，Western blot测定B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关X(Bax)蛋白，比色法检测乳酸脱氢酶（LDH）释放量和超氧化物歧化酶（SOD）活性，实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测细胞中微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)表达。结果 与H/R组比较，低、中及高剂量根皮苷处理后抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达、LDH含量、miR-125a-5p表达依次降低，SOD活性、Bcl-2蛋白表达依次增加（P<0.05）。抑制miR-125a-5p表达后，H/R处理细胞的抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达及LDH含量降低，SOD活性、Bcl-2蛋白表达增加（P<0.05）。miR-125a-5p过表达逆转了根皮苷对H/R刺激H9C2细胞凋亡、增殖及氧化应激的作用。结论 根皮苷可能通过降低miR-125a-5p表达来减轻H/R诱导的H9C2细胞的氧化应激和凋亡。

关键词： 清肺消积颗粒   肺癌   PI3K/AKT通路   凋亡  

摘要： 研究清肺消积颗粒（Qingfeixiaoji granules，QFXJ）对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及对肿瘤细胞凋亡的影响，选取45只雄性C57BL/6J小鼠，建立Lewis肺癌小鼠模型，随机分为模型组（model group，Mod）、顺铂组（cisplatin group，DDP）、QFXJ低剂量组（low dose QFXJ group，QFXJ-L）、QFXJ中剂量组（middle dose QFXJ group，QFXJ-M）、QFXJ高剂量组（high dose QFXJ group，QFXJ-H），每组9只，另选9只C57BL/6J小鼠设为空白组（control group，Con）。DDP腹腔注射0.2 mL顺铂（剂量为2 mg/kg），2 d/次，QFXJ-L、QFXJ-M、QFXJ-H灌胃0.4 mLQFXJ（剂量依次为12、24、48 g/kg），1 d/次，连续给药14 d后剥离肿瘤组织并收集血液，计算抑瘤率；苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin，HE）观察肿瘤组织病理情况；酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法测定血清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）的含量；蛋白质免疫印迹（Western blot，WB）法测定肿瘤组织中磷脂酰肌3-激酶（phosphatidylinositol 3 kinase，PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（phosphorylated protein kinase B，p-AKT）、B细胞淋巴瘤-2（B cell lymphocyte tumor 2，Bcl-2）、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）、半胱天冬酶3（cysteinyl aspartate specific proteinase-3，Caspase-3）的表达水平；原位末端转移酶标记（TdT-mediated dUTP nick-end labeling，TUNEL）技术观察肿瘤组织中细胞的凋亡情况。结果发现，与Mod相比，QFXJ-M、QFXJ-H与DDP瘤重均显著降低（P < 0.05）；肿瘤组织病理结果显示，QFXJ-L、QFXJ-M、QFXJ-H肿瘤细胞密度均有不同程度降低，坏死细胞密度增加；QFXJ-M、QFXJ-H与DDP血清中TNF-α、IL-6和IL-1β表达量均显著降低（P < 0.05）；QFXJ-H与DDP肿瘤组织中PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白表达水平降低，Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著升高（P < 0.05）；TUNEL荧光结果显示，各给药组阳性细胞数量较模型组均有不同程度增多。得出结论，QFXJ可能通过调控PI3K/AKT信号通路相关靶点，上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达，下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达，从而促进肺癌细胞凋亡，抑制肺癌组织生长。