关键词:
类器官
胎盘部位滋养细胞肿瘤(PSTT)
细胞培养
摘要:
目的构建并鉴定人源胎盘部位滋养细胞肿瘤(placental site trophoblastic tumor,PSTT)的类器官模型。方法选取PSTT组织进行消化和分离,得到肿瘤细胞后进行基质胶包埋,利用特定的类器官培养基进行培养。HE染色观察类器官模型的组织学形态,通过免疫组化和免疫荧光染色分析中间型滋养细胞标志物人胎盘催乳素(human placental prolactin,HPL)、人类白细胞抗原-G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)和胎盘碱性磷酸酶(placental alkaline phosphatase,PLAP)的表达,鉴定构建的PSTT类器官模型与PSTT组织之间的一致性。同时对构建的模型进行传代及冻存、复苏,显微镜下分析其生长形态与速度,探讨其作为类器官模型在PSTT基础及临床转化研究应用的可能性。结果构建的类器官模型可稳定增殖并传代,可见其从小微球状态长成紧致实性球体或带有滤泡样结构的球体,约7~10天可长满并传代,冻存及复苏后细胞状态稳定;经HE染色发现类器官中细胞形态与PSTT原代肿瘤细胞相似;免疫组化与免疫荧光染色鉴定结果显示,PSTT类器官组织高表达中间型滋养细胞的标志分子HPL、HLA-G和PALP,提示构建的类器官模型主要包含中间型滋养细胞。结论成功建立了人源PSTT类器官(adult-derived PSTT organoid,ADPO)模型并进行鉴定。