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关键词： EGFR基因   转录组测序   蛋鸡   颗粒细胞   差异表达基因  

摘要： 本文旨在研究鸡卵泡颗粒细胞EGFR基因的功能并对其过表达后进行转录组和生物信息学分析，为进一步研究EGFR基因在鸡卵泡颗粒细胞发育中的调控机制提供理论基础。利用qRT-PCR技术探索EGFR基因过表达后细胞凋亡关键基因（BCL2、c-myc、casp3）以及氧化应激相关基因（SOD2、CYP19、GPX2）的表达量，进而确定其在颗粒细胞中的功能；利用RNA-seq测序技术对EGFR基因过表达后的卵泡颗粒细胞进行转录组学分析，筛选差异表达基因，并对其进行GO和KEGG注释及qRT-PCR验证。在对照组（空载体）和试验组（EGFR基因过表达）颗粒细胞样本中分别获得2.361×107和2.399×107条Clean Reads，其中对照组和试验组共有90.61%的Clean Reads比对到鸡参考基因组上。DESeq分析发现共有1 356个基因在2组间差异表达，其中790个基因上调，566个基因下调，包括与细胞功能相关基因，如SLC2A12、HSPB9、ANO1、CCL4、HMOX1、Nurr1等。GO分析发现，差异表达基因主要富集在转录正调控、DNA模板化、含有核酸酶的化合物代谢的阳性调节以及RNA代谢的正调控等过程。KEGG通路主要富集在类固醇生物合成、溶酶体和局部粘连及细胞外基质受体相互作用等过程。GO和KEGG富集结果表明，EGFR基因过表达后，SLC2A12、HSPB9、ANO1基因表达量显著或极显著上调，CCL4、HMOX1、NR4A2基因表达量显著或极显著下调，推测EGFR基因可以通过调控颗粒细胞中相关基因及信号通路的表达，进而调控卵泡的发育。本研究为分析EGFR基因对卵泡发育的调控机制提供了理论参考依据。

关键词： 骨肉瘤   lncRNA   LINC01094   增殖   侵袭   迁移  

摘要： 目的 通过研究LINC01094对骨肉瘤细胞增殖、侵袭和迁移等生物学行为的影响，明确LINC01094对骨肉瘤进展的影响。方法 采用转录组高通量测序检测5对骨肉瘤组织及其瘤旁组织中差异表达的lncRNAs。采用RT-qPCR实验检测骨肉瘤细胞系U2OS、Saos2和HOS以及成骨细胞系hFOB1.19中LINC01094的表达水平。将骨肉瘤U2OS细胞分为si-LINC01094组和对照组，分别转染LINC01094的小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)序列和阴性对照（negative control, NC）序列，并采用RT-qPCR检测siRNA的转染效率。采用CCK-8实验检测两组细胞在24,48,72,96 h的增殖能力，采用Transwell侵袭和迁移实验检测两组细胞的侵袭和迁移能力。结果 高通量测序结果显示，LINC01094等多个lncRNAs在骨肉瘤组织中的表达水平较瘤旁组织明显增高（P<0.001）。RT-qPCR实验结果显示，LINC01094在骨肉瘤细胞系中的表达水平明显高于成骨细胞系hFOB1.19(P<0.01)。si-LINC01094组U2OS细胞中LINC01094的表达水平明显低于对照组（P<0.001）。CCK-8实验结果显示，si-LINC01094组在72 h和96 h的OD值明显低于对照组（P<0.01）。Transwell侵袭和迁移实验结果显示，si-LINC01094组穿膜细胞数明显低于对照组（P<0.01）。结论 LINC01094可通过促进骨肉瘤细胞的增殖、侵袭和迁移，进而促进骨肉瘤进展。

关键词： "双减"政策   初中英语   课堂教学  

摘要： "双减"政策的核心理念是减负增效,对教师的教学模式、教学策略以及学生的学习方式提出了全新的要求,初中教师唯有与时俱进,通过不断丰富教学内容、创新教学手段、优化教学设计强化学生的英语素养,才能提升初中英语课堂教学的实效性.基于此,本文探讨了"双减"政策背景下诸多教师在进行初中英语课堂教学时普遍存在的一些不足之处,在此基础上提出有针对性的教学策略,以期为初中英语教师在课堂教学中真正实现减负增效提供有益的参考.

关键词： 数字化转型   适应性动态能力   财务柔性   财务绩效  

摘要： 在数字经济的背景下，企业通过数字化转型寻求提升其财务绩效。通过构建经营结果随机波动条件下的融资-生产决策模型，本文揭示了数字化转型通过动态能力影响财务绩效的内在机制，指出作为动态能力具体维度的财务柔性在绩效提升过程中的调节性影响以及中介作用。本文基于2007—2020年的A股面板数据对理论模型进行检验，实证研究发现：第一，数字化转型能够增强企业对市场环境波动的适应能力，进而能够显著提高企业的财务绩效。第二，财务柔性在上述过程中同时发挥中介作用与调节作用，具备财务柔性的企业实施数字化转型可更好地提升其财务绩效。本文有助于丰富数字化对企业管理作用的有关理论，并为更好地发挥企业数字化转型的作用提供相关启示。

关键词： 光周期   投喂时间   生物钟基因   养殖条件   大海马  

摘要： 生物节律在生物的代谢活动中扮演非常重要的角色。文章以大海马(Hippocampus kuda)为研究对象,分别设置2个光周期(L﹕D=16﹕8、L﹕D=12﹕12)和2个投饵时间策略(开灯后2h、关灯前2h),分析大海马的生物钟系统之间以及生物钟与脂类代谢之间的关系,探究大海马人工养殖的适宜环境条件以及其体内重要脂类物质的合成代谢条件。结果表明:在所有组别中,检测的7个钟基因中有6个基因(Clock、Bmal1、Per1、Per2、Per3和Cry1)在大海马的脑和肝脏中都有明显的节律性表达,说明生物钟基因表达与光有较密切的关系。其中,大海马在长光亮期(16:8)及开灯后2h投喂的条件下,其脑中的中枢钟基因与肝脏中的外周钟基因间的协同性最佳,表明该条件对大海马生长较为有利。此外,大海马肝脏中8个脂类代谢相关基因(Hmgcr、Mvk、Mvd、Lss、Fdps、Cetp、Scap、Srebp1)在开灯后2h投喂的2个组别中都呈现了节律性表达,而在关灯前2h投喂的2个组别中仅Hmgcr、Mvk、Scap、Srebp1等4个基因(L﹕D=16﹕8)和Hmgcr、Mvk、Scap、Mvd、Srebp1等5个基因(L﹕D=12﹕12)有明显节律性表达,说明脂类代谢相关基因的表达与光影响并不非常密切,大部分基因的表达受到了投喂时间的影响。总之,实验证实了大海马中存在有完整的生物钟系统,该生物钟系统与脂类代谢间存在紧密的联系。通过光和投喂时间的综合分析,初步推断大海马养殖的适宜条件为长光亮周期及在有光时及时给饵(开灯后2h内),该条件下能促使大海马的钟基因与代谢基因都呈现稳定的节律性表达,且中枢钟系统与外周钟系统间的协同性达到最佳。同时,也能较好地促进脂类物质的代谢合成和积累。