关键词:
多房棘球蚴病
NK1.1
CD4
T细胞
CD8
T细胞
摘要:
目的 观察多房棘球蚴感染晚期小鼠肝脏中NK1.1+T细胞效应功能的变化。方法 建立多房棘球蚴感染小鼠模型,感染晚期(36周)取小鼠肝脏,大体及HE染色观察病灶感染情况。Masson、天狼星红染色观察小鼠肝脏纤维化情况,流式细胞术检测小鼠肝脏T细胞不同亚群CD4+T细胞、CD8+T细胞数量、及亚群中NK1.1的表达、及NK1.1+T颗粒酶B、穿孔素、细胞干扰素-γ (IFN-γ)、白细胞介素-17 (IL-17)的分泌表达。采用SPSS25.0软件进行统计学分析,采用独立样本t检验。结果 与对照组相比,HE染色显示感染组小鼠肝脏被病灶广泛占据,病灶周围出现大量炎性细胞浸润。Masson染色显示感染组小鼠肝脏病灶周围出现大量蓝色胶原沉淀。天狼星红染色示感染组肝脏胶原纤维面积增多。流式细胞数结果显示感染组小鼠肝脏的CD4+T及CD8+T细胞的数量比分别为(31.95±6.04)%、(42.03±13.93)%,与对照组的(36.60±9.04)%(50.19±5.15)%相比均无统计学意义(t=1.068、 1.446,均P>0.05)。然而,感染组NK1.1+CD4+T细胞的数量比(29.98±14.51)%,NK1.1+CD8+T细胞数量比为(21.98±12.87)%,均低于对照组细胞数量比例(69.03±10.74)%、(43.61±5.94)%(t=5.573、3.999,均P <0.01)。感染组内,NK1.1-CD4+T细胞的数量比(51.55±10.81)%,高于NK1.1+CD4+T细胞数量比例(29.98±14.51)%(t=2.920,P <0.05);NK1.1-CD8+T细胞数量比为(63.98±13.59)%,高于NK1.1+CD8+T细胞(21.98±12.87)%(t=5.496,均P <0.01)在功能上,感染组小鼠肝脏分泌颗粒酶B、IFN-γ、IL-17的NK1.1+CD4+T细胞百分比分别为(4.78±2.83)%、(6.77±6.05)%、(6.89±5.16)%,显著低于对照组的(12.62±4.77)%、(23.56±7.33)%、(22.1±7.09)%(t=3.462、4.171、4.124,均P <0.01),而感染组与对照组分泌穿孔素的NK1.1+CD4+T细胞百分比分别是(3.01±1.28)%、(22.1±7.09)%,没有统计学意义(t=1.027,P> 0.05)。感染组内,小鼠肝脏分泌颗粒酶B的NK1.1+CD4+T细胞百分比为(4.78±2.83)%,显著低于NK1.1-CD4+T细胞的(6.74±2.05)%(t=2.629,P <0.05),分泌IFN-γ、穿孔素、IL-17的NK1.1+CD4+T细胞分别是(6.77±6.05)%、(3.01±1.28)%和(6.89±5.16)%,与NK1.1-CD4+T细胞的(6.73±5.19)%、(3.59±2.39)%和(2.08±1.33)相比无统计学意义(t=0.019、0.592、2.125;均P> 0.05)。感染组小鼠肝脏分泌颗粒酶B、IFN-γ、IL-17的NK1.1+CD8+T细胞百分比分别为(1.54±0.89)%、(5.28±2.71)%、(3.70±2.34)%,显著低于对照组的(6.00±2.69)%、(18.10±9.47)%(16.86±9.34)%(t=3.861、 3.196、 3.361, P<0.01、 0.05、0.01),而感染组与对照组分泌穿孔素的NK1.1+CD8+T细胞百分比分别是(2.73±1.21)%、(2.14±1.60)%,没有统计学意义(t=0.717, P>0.05)。感染组内,小鼠肝脏分泌IFN-γ的NK1.1+CD8+T细胞百分比为(5.28±2.70)%,显著低于NK1.1-CD8+T细胞的(13.73±9.22)%(t=2.609,P <0.05),分泌IL-17的NK1.1+CD8+T细胞百分比为(3.70±2.34)%,高于NK1.1-CD8+T细胞的(1.04±0.40)%(t=2.674,P <0.05),分泌颗粒酶B、穿孔素的NK1.1+CD8+T细胞分别是(1.54±0.89)%和(2.73±1.21)%,与NK1.1-CD8+T细胞的(1.88±1.08)%、和(2.23±0.97)相比无统计学意义(t=1.353、0.966;均P> 0.05)。采用SPSS25.0软件进行统计学分析,采用独立样本t检验。结论 多房棘球蚴感染晚期小鼠肝脏中NK1.1+CD4+T细胞、NK1.1+CD8+T细胞数量减少,分泌颗粒酶B、干扰素-γ功能减弱,提示多房棘球蚴感染晚期肝脏中NK1.1+T细胞存在免疫耗竭。