关键词:
糖尿病
鸡内金多糖
胰岛β细胞
核因子E2相关因子
作用机制
中药研究
摘要:
目的探究鸡内金多糖对高糖诱导后胰岛β细胞相关活性和对超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及核因子E2相关因子2(Nrf2)等相关指标所产生的影响。方法取胰岛β细胞MIN6,培养检测其活性后分为正常组(5.5 mmol·L^(-1)正常糖处理4 h)、高糖组(高脂高糖处理1 h,33.3 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.25 mmol·L^(-1)棕榈酸)、鸡内金多糖低剂量组(20μmol·L^(-1)鸡内金多糖预处理4 h+高脂高糖处理24 h)、鸡内金多糖高剂量组(80μmol·L^(-1)鸡内金多糖预处理4 h+高脂高糖处理24 h),采用5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测各组细胞增殖率,缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,分析细胞周期,细胞划痕实验检测MIN6细胞迁移功能,检测MIN6细胞培养液中SOD、MDA水平,免疫印迹法检测MIN6细胞中Nrf2、醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素单加氧酶-1(HO-1)蛋白表达,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测MIN6细胞中Nrf2、HO⁃1、NQO1 mRNA表达。结果与正常组比较,高糖组MIN6细胞增殖率,SOD及Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA和蛋白均降低,MDA及细胞凋亡率升高(P<0.05);与高糖组比较,鸡内金多糖低剂量组MIN6细胞增殖率,SOD及Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA和蛋白升高、MDA及细胞凋亡率降低(P<0.05);与鸡内金多糖低剂量组比较,鸡内金多糖高剂量组MIN6细胞增殖率,SOD及Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA和蛋白升高,MDA及细胞凋亡率降低(P<0.05)。与正常组比较,高糖组MIN6细胞周期G_(0)/G_(1)升高,S、G_(2)/M降低(P<0.05);与高糖组比较,鸡内金多糖低剂量组MIN6细胞周期G_(0)/G_(1)降低,S和G_(2)/M升高(P<0.05);与鸡内金多糖低剂量组比较,鸡内金多糖高剂量组MIN6细胞周期G_(0)/G_(1)降低,S、G_(2)/M升高(P<0.05)。划痕结果显示,0 h各组空白区无差异;24 h高糖组空白区增大;鸡内金多糖低剂量组空白区域有所缩小;鸡内金多糖高剂量组空白区域总体显著变窄。结论鸡内金多糖能够促进胰岛β细胞MIN6的增殖,抑制其凋亡,可能与抑制Nrf2等相关通路相关。