关键词:
非酒精性脂肪性肝病
酪酸梭菌
肠黏膜通透性
机制
摘要:
目的探讨酪酸梭菌(CB)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肠黏膜通透性的影响及相关机制。方法使用高脂饮食构建NAFLD小鼠模型,将小鼠分为模型组(Mod)、酪酸梭菌低剂量组(CBL,0.5×10^(7) CFU/mL)、酪酸梭菌高剂量组(CBH,1.0×10^(7) CFU/mL),同时设置正常对照组(Con),每组8只,每周记录1次小鼠体质量。末次给药完成后小鼠禁食12 h,心脏取血,取肝脏组织、小肠组织,应用酶联免疫吸附法检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、二胺氧化酶(DAO)水平和肝脏组织IL-6、TNF-α水平;苏木精-伊红染色观察肝脏组织病理变化;Western blot检测小肠组织中紧密连接蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)蛋白表达。结果随着培养时间的延长,各组小鼠体质量均呈增长趋势,培养第4周开始,Mod小鼠体质量明显高于Con小鼠,CBL、CBH小鼠体质量较Mod小鼠均有降低(均P<0.05),CBH小鼠体质量下降幅度更为明显。Mod小鼠血清ALT、AST、TC、TG水平明显高于Con小鼠(P<0.01);CBL、CBH小鼠血清ALT、AST、TC、TG水平明显低于Mod小鼠(P<0.05),CBH小鼠下降幅度更明显。苏木精-伊红染色显示,CBL、CBH小鼠肝组织中纤维结构和肝小叶结构较Mod小鼠明显改善,脂肪沉积、细胞变性和坏死、炎症细胞浸润也明显减轻。Mod小鼠血清DAO水平及肝组织中IL-6、TNF-α水平明显高于Con小鼠(P<0.01);CBL、CBH小鼠血清DAO水平及肝组织中IL-6、TNF-α水平明显低于Mod小鼠,CBH小鼠明显低于CBL小鼠(均P<0.05)。Mod小鼠小肠组织中Occludin表达水平、ZO-1蛋白表达水平明显低于Con组小鼠(P<0.01);CBL、CBH小鼠小肠组织中Occludin、ZO-1蛋白表达水平明显高于Mod小鼠,CBH小鼠明显高于CBL小鼠(均P<0.05)。结论NAFLD小鼠肠黏膜屏障受损可导致纤维结构和肝小叶结构破坏,紧密连接表达减少,CB可通过上调Occludin、ZO-1蛋白表达增强紧密连接,进而改善肠黏膜通透性。