关键词:
指状青霉
链霉菌R_(2)A-15
抑菌活性
发酵优化
稳定性
摘要:
柑橘是我国最重要的水果之一,其采后发生的柑橘绿霉病严重威胁柑橘的质量安全,而且还会引起果品中真菌毒素的污染。本团队从广东省湛江市廉江九洲江红橙园的红橙植株根部土壤中,分离筛选出一株对柑橘绿霉病病原菌具有良好拮抗作用的链霉菌R_(2)A-15,对其进行发酵条件优化和抑菌活性稳定性分析,为柑橘绿霉病生防菌剂的制备与应用提供参考。本研究以指状青霉(Penicillium digitatum)为靶标菌,根据纸片扩散法的抑菌圈直径大小判断发酵液抑菌活性。采用单因素和交叉组合试验优化菌株R_(2)A-15发酵培养基,通过响应面分析法对发酵条件进行优化,提高发酵液抑菌活性,并对发酵液进行不同的酸碱、温度和紫外线条件的稳定性研究。在单因素试验和交叉组合试验中,菌株发酵培养基的最适碳源为玉米面,最适氮源为酸水解酪蛋白。根据响应面分析法,得出玉米面和发酵时间对发酵液抑菌活性有显著影响。经验证试验得出,最大的发酵液抑菌活性的最优发酵培养基为:玉米面12.09 g,酸水解酪蛋白4.00 g,碳酸钙2.00 g,硫酸镁2.00 g,磷酸氢二钾2.00 g,氯化钠1.00 g,蒸馏水1 L;最优发酵条件为:发酵初始pH7.0、发酵时间37.50 h、发酵温度34℃、接种量3%、摇瓶装液量100 mL/250 mL。菌株发酵液抑菌活性优化后比优化前提高了39%。菌株发酵液经过不同的温度和紫外线条件处理后,整体抑菌活性能维持在一个相对稳定的高活性水平上,但在强酸强碱条件下,发酵液抑菌活性有所下降。结果表明,链霉菌R_(2)A-15对柑橘绿霉病病原菌具有较好的稳定抑菌效果,有较好的实际应用前景,为后期规模化发酵以及菌剂的开发奠定基础。