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关键词： 肠道结构   盐碱胁迫   基因表达   青海湖裸鲤  

摘要： 为探究盐碱胁迫对青海湖裸鲤(Gymnocypris przewalskii)肠道的影响，将体重为(8.13±1.45)g的青海湖裸鲤一龄鱼驯养在水温为(15.3±1.6)℃的不同胁迫环境中养殖28 d，不同胁迫有盐胁迫组(Y100)、碱胁迫组(J100)和盐碱混合胁迫组(YJ100)，以3‰盐度为对照组(CK)。结果显示：J100组水环境的pH值最高，CK组最低。Y100组水环境的氨氮含量最高，YJ100组最低。Y100组青海湖裸鲤的肠道结构较其他组更加完全，浆膜层完整，纹状缘发达；J100组和YJ100组裸鲤前肠结构受到损伤，肌层厚度从前肠到后肠逐渐变薄；肠道的皱褶高度方面，CK组与Y100组前肠最高，中肠次之，后肠最低，YJ100组则反之；J100组中肠皱褶高度最高，后肠次之，前肠最低。不同胁迫组渗透相关基因GpAQP1、GpMAPK14、GpPLA2、GpCA2均在中肠表达量较高，而GpNKA1、GpALP则在前肠表达量较高。总之，碱处理和盐碱处理损伤了青海湖裸鲤肠道结构，从而影响了鱼体的生长发育，这一结论为解释自然状态下青海湖裸鲤生长缓慢提供研究方向。

关键词： 纤维连接蛋白   神经干细胞   少突胶质前体细胞   少突胶质细胞   细胞增殖   细胞分化   工程化干细胞   工程化细胞  

摘要： 背景：少突胶质前体细胞是治疗脑白质损伤性疾病的种子细胞，建立高效稳定扩增的体外诱导分化方法是实现临床转化研究的重要前提。目的：探讨纤维连接蛋白对人神经干细胞来源少突胶质前体细胞增殖、迁移和分化等生物学特性的影响。方法：将悬浮培养的人神经干细胞用Accutase消化成单细胞，通过流式细胞术检测特异性标志物Nestin、Sox2、Vimentin、CD133、Musashi的表达。然后将人神经干细胞单细胞重悬于少突胶质前体细胞培养基，接种于不同质量浓度纤维连接蛋白(0,1,2.5,5,10μg/mL)包被的6孔板中，培养7 d后Accutase消化进行传代，锥虫蓝染色计数细胞，选择扩增能力最强的纤维连接蛋白包被与未用纤维连接蛋白包被的少突胶质前体细胞进行下一步实验，Transwell小室检测细胞迁移能力，流式细胞术检测Olig2、Sox10、PDGFR-α的表达。将少突胶质前体细胞向少突胶质细胞诱导分化3周，免疫荧光染色检测分化细胞Galc的表达。结果与结论：(1)人神经干细胞呈悬浮球状生长，流式细胞术检测结果显示，人神经干细胞高表达Nestin、Sox2、Vimentin、CD133和Musashi；(2)由人神经干细胞诱导的少突胶质前体细胞的胞体为圆形或椭圆形，折光性强，有双极或三级突起结构；与0μg/mL纤维连接蛋白包被组比较，2.5,5,10μg/mL纤维连接蛋白包被组少突胶质前体细胞的扩增能力显著增强(P <0.05)；当纤维连接蛋白质量浓度为10μg/mL时，少突胶质前体细胞扩增能力最强；(3)流式细胞术检测结果显示0,10μg/mL纤维连接蛋白包被组均高表达少突胶质前体细胞标志物Olig2、Sox10和PDGFR-α，两组无统计学差异(P> 0.05)；(4)Transwell小室检测结果显示，与0μg/mL纤维连接蛋白包被组比较，10μg/mL纤维连接蛋白包被组少突胶质前体细胞的迁移能力增加(P <0.01)；(5)少突胶质前体细胞向少突胶质细胞分化3周，细胞呈多分支、网格状或膜片样复杂形态，免疫荧光染色结果显示两组少突胶质细胞Galc阳性率无统计学差异(P> 0.05)。结果表明，纤维连接蛋白质量浓度为10μg/mL时对少突胶质前体细胞的增殖和迁移作用最强，但不影响少突胶质前体细胞特异性标志物Olig2、Sox10和PDGFR-α的表达及其向少突胶质细胞的分化。

关键词： 乌蒙乌骨鸡   TYR基因   启动子区   转录因子   调控元件  

摘要： 本研究旨在克隆乌蒙乌骨鸡酪氨酸酶（TYR）基因启动子区序列并解析其分子结构特征，为探究该基因调控乌蒙乌骨鸡乌质性状的分子机制提供参考。以乌蒙乌骨鸡血液基因组DNA为模板，设计3对特异性引物，通过PCR扩增、Sanger测序及序列拼接方法获得TYR基因启动子区序列；采用DNAStar Lasergene和MEGA 5.0软件分别进行15个物种TYR基因启动子区序列相似性分析及系统进化树构建；利用生物信息学软件预测分析该序列核心启动子、调控元件、转录因子和CpG岛等分子结构特征。结果显示，乌蒙乌骨鸡TYR基因启动子区序列长3 216 bp（Genbank登录号：ON49713457），包括5'侧翼区2 858 bp和358 bp部分外显子1。乌蒙乌骨鸡与其他14个物种TYR基因相似性为40.9%～99.9%，乌蒙乌骨鸡与原鸡、鹌鹑等鸡形目亲缘关系较近，与猪亲缘关系较远。-600～-59 bp可能为乌蒙乌骨鸡TYR基因候选核心启动子区域，5'侧翼区-523 bp处可能存在1个转录起始位点C，存在1个CAAT-box、3个TATA-box、16个E-box、2个进化保守区域CR1和CR2、5个5'侧翼区近端黑色素细胞特异性元件（p-MSE），不存在CpG岛。乌蒙乌骨鸡TYR基因启动子区存在潜在的C/EBP-α、GATA-1、Sp1、Pdx1、TBP和NF-1等转录因子。本研究成功克隆获得乌蒙乌骨鸡TYR基因启动子区序列，为解析该基因调控乌蒙乌骨鸡乌质性状的分子机制提供了理论依据。

关键词： 人呼吸道合胞病毒   B亚型   全基因组   分子特征  

摘要： 目的:分析1株青海省人呼吸道合胞病毒(HRSV)全基因组的基因特征。方法:收集2024年青海省流感监测哨点医院的发热并伴有严重呼吸道感染症状的标本共300份，通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法筛选出HRSVB阳性标本，对符合测序要求的阳性标本进行全基因组测序。在GenBank数据库下载HRSVB全球各基因型别代表株后进行序列比对、亲缘关系进化树构建和遗传距离的计算分析，分析HRSVB测序株序列核苷酸、氨基酸的同源性和氨基酸变异。结果:青海首株China/qinghai/2024-03的全基因组序列为15 140bp，具有HRSV的所有结构特征，与HRSVA亚型原型株Long株的核苷酸同源性最低为80.0%，与HRSVB亚型原型株核苷酸同源性94.7%，说明青海首株为HRSVB亚型;遗传进化显示China/qinghai/2024-03与USA/WA-S23450/2021(OR326803.1)及Germany/2021(OR795235.1)同属一个分支，提示亲缘关系最近，G基因遗传进化分析表明该毒株属于HRSVB亚型BA9基因型，相似性分析表明基因组的高变区域为SH和G基因。结论:本研究首次获得HRSV China/qinghai/2024-03全基因组序列，并阐明了其基本的分子结构特征，填补了青海省HRSV病毒的基因及氨基酸数据空缺，也为HRSV流行病学提供了依据。

关键词： 最优控制   竞争种群   污染   极大值原理  

摘要： 本文研究污染环境中生育率和死亡率依赖于加权大小的竞争种群模型的最优控制问题.应用不动点定理得到了上述模型非负解的存在性和唯一性.借助极大值原理验证了最优控制策略的存在性,利用法锥性质获得了针对控制问题的最优条件.

关键词： 手足口病   柯萨奇病毒A16   分子流行病学   B1c遗传进化分支  

摘要： 目的:了解2020—2023年间柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16, CVA16)在福建省的分子流行病学特征。方法:对2020—2023年福建省CVA16相关手足口病(hand, foot and mouth disease, HFMD)进行流行病学特征分析;RT-PCR扩增CVA16完整VP1基因并进行序列测定，采用MEGA X等软件进行CVA16的遗传进化分析。结果:福建省2020—2023年合计13 120份HFMD病例，CVA16相关HFMD构成比为16.5%(2 160/13 120)，其中，2020—2023年各年度分别占4.7%(94/2 019)、14.1%(457/3 243)、47.6%(1 521/3 199)、1.9%(88/4 659)。CVA16引起HFMD患者主要集中在1~5岁儿童，3岁居多。获取的福建省2020—2023年92条完整CVA16 VP1基因序列遗传进化和基因型特征分析显示，福建省CVA16毒株与原型株遗传距离较远;2020—2023年福建省CVA16基因型存在B1a、B1b、B1c三种基因进化分支，其中，福建省2020年B1a与B1b构成比各占40%和60%;2021年B1a与B1b各占81.8%和18.2%;2022年仅有B1a;2023年有B1a、B1b与B1c，分别占44.4%、7.4%、48.2%，1~9月以B1a为主要流行株，10月后福建省既往未曾发现且在国内罕见的B1c被检出，并成为优势基因分支。结论:福建省CVA16优势基因进化分支从2020年的B1b逐渐转变为2021—2023年的B1a。2023年10月后，福建省新发现的B1c成为本省优势基因进化分支。

摘要： 2024年10月9日，《Cell》杂志发表了题为"Using Artificial Intelligence to Document the Hidden RNA Virosphere"文章。中山大学侯新博士、阿里云贺勇为文章共同第一作者。中山大学施莽教授、阿里云李兆融和悉尼大学Edward Holmes教授为文章共同通讯作者。

关键词： 鼻病毒   新型冠状病毒   临床特征   加重儿童  

摘要： 目的:本研究旨在阐明新型冠状病毒疫情背景下鼻病毒感染患儿的临床特征，探讨新冠病毒近期感染史对其临床特征的影响。方法:收集2022年7月至2023年10月在杭州市儿童医院住院的经实验室确诊为鼻病毒检测阳性的286例患儿的临床资料、实验室检查结果;并回顾性调查所有研究对象在本次住院前6个月内是否曾有新冠病毒感染病史。结果:286例鼻病毒检测阳性患儿中，单纯鼻病毒阳性者180例(62.94%)，合并其他病原体感染者106例(37.06%);180例单纯鼻病毒阳性患儿中，56.67%患儿出现喘息症状。其中15例(15/180，8.33%)患儿表现为哮喘急性发作;7例(7/180，3.88%)表现为重症肺炎。根据患儿在本次住院前6个月内有无新冠病毒感染病史，分为既往有新冠病毒感染组、既往无新冠病毒感染组。两组间在性别、发病年龄、发热高峰、喘息发生率、肺炎发生率、重症肺炎占比率、重度哮喘发作的占比率、发热持续时间、喘息缓解时间、住院时间、白细胞计数、嗜酸粒细胞计数、C反应蛋白、降钙素原、免疫球蛋白E、氧疗需求、静脉激素使用情况等方面均无显著性差异( P>0.05)。 结论:喘息发生率、肺炎发生率、重症肺炎占比率、重度哮喘发作的占比率近6个月内有新冠病毒感染病史并不会导致鼻病毒感染患儿的临床症状加重，亦不会增加其喘息发生率。

关键词： 轮状病毒感染   腹泻   免疫   儿童,学龄   神曲消食口服液   喜炎平  

摘要： 目的 探讨神曲消食口服液联合喜炎平治疗小儿轮状病毒感染性腹泻的疗效及对免疫功能的影响。方法将200例轮状病毒感染性腹泻患儿随机均分为2组，对照组患儿予以喜炎平治疗，实验组患儿予以神曲消食口服液联合喜炎平治疗，比较2组治疗效果及对患儿炎性因子及免疫功能的影响。结果 实验组临床总有效率高于对照组（P<0.05）；治疗后，实验组患儿中医证候积分、血清白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（INF）-γ、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）水平及CD8+水平均低于对照组（P<0.05），血清CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平均高于对照组（P<0.05）。实验组患儿止泻时间早于对照组，轮状病毒转阴率高于对照组（P<0.05）。结论 神曲消食口服液联合喜炎平治疗小儿轮状病毒感染性腹泻能快速缓解患儿症状，减轻炎症反应，提高免疫功能。

关键词： 戊型肝炎病毒   猪肝   病毒回收   核酸检测   基因分型  

摘要： 目的:对猪肝中戊型肝炎病毒(hepatitis E virus，HEV)核酸检测方法进行优化和比较，为动物内脏标本中HEV检测提供技术参考。方法:分别采用三种方法(PBS匀浆处理法、蛋白酶K处理法、氯仿抽提法)对人工污染HEV粪便悬液的猪肝标本进行前处理和病毒核酸提取，通过HEV RT-qPCR检测，比较HEV回收率、抑制率。将筛选出的最优的HEV检测方法应用于市售猪肝检测，对检出的阳性标本进行HEV基因分型。结果:PBS匀浆处理法、蛋白酶K处理法、氯仿抽提法的HEV回收率分别为9.88%、0.19%和17.28%。蛋白酶K处理法的回收率小于1%，舍弃该方法，对其他两种方法进行 t检验，结果表明两种方法回收率的差异具有统计学意义( t＝26.801， P<0.001)，氯仿抽提法的回收率较高。三种方法的抑制率均小于75%，在ISO/TS 15216-2∶2019标准的范围内。在192份市售猪肝标本中检出17份HEV RNA阳性标本，核酸阳性率为8.85%，其中5份标本HEV基因分型成功，均为基因4型。 结论:用氯仿抽提法对猪肝进行前处理，病毒回收效果较好，且在市售猪肝标本中检出HEV核酸阳性标本，该方法可用于食品中病毒的检测。