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关键词： 腺病毒载体   呼吸道合胞病毒   G蛋白   中央保守域   疫苗  

摘要： 目的 以非复制型的5型人腺病毒(human adenovirus type 5，Ad5)为载体，构建重组呼吸道合胞病毒G蛋白(RSV-G)保守域的腺病毒载体疫苗，利用小鼠评价其免疫原性及免疫保护效果。 方法 利用分子克隆方法构建插入能串联表达A亚型和B亚型RSV-G保守域(Gbcc和Gacc)的重组Ad5载体质粒(Ad5-Gbcc-Gacc)并转染HEK293A细胞，获得重组腺病毒Ad5-Gbcc-Gacc；通过多酶切鉴定病毒Ad5-Gbcc-Gacc的基因组，用Western blot验证Gbcc-Gacc基因的表达水平；重组腺病毒通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠1次，在第6周用RSV Long毒株对小鼠以滴鼻的方式进行攻毒。用酶联免疫吸附试验(Elisa)检测和评价免疫小鼠血清IgG及抗体亚型，用微中和检测的方法测定中和抗体水平，同时每天记录小鼠攻毒前后的体重，并检测小鼠肺组织的病理变化、肺和鼻组织中RSV病毒拷贝数。 结果 Western blot及多酶切鉴定结果与预期相符，表明重组腺病毒拯救成功。Ad5-Gbcc-Gacc在小鼠体内可以诱导较高滴度的特异性IgG、中和抗体水平及Th1/Th2平衡的免疫反应。与未免疫小鼠比较，经Ad5-Gbcc-Gacc免疫小鼠攻毒后肺部只有轻微病理损伤，且肺部及鼻甲的病毒拷贝数降低。 结论 Ad5-Gbcc-Gacc具备良好的免疫原性，并能对RSV感染小鼠有一定的保护作用，为进一步研制基于G蛋白的RSV疫苗奠定了基础。

关键词： 宏观生态系统   量纲体系   生态系统性状   资源环境效应  

摘要： 宏观生态系统科学致力于探索并理解生态系统的结构、功能和过程机制。精准度量和定量描述生态系统基本属性和状态变化，并建立相应的度量方法及量纲体系，是促进宏观生态系统研究发展的关键环节。因此，基于传统的生物、土壤等生态系统要素属性，以及植物器官、个体和物种等水平的生物性状研究成果，构建定量表征生态系统本征属性及状态变化的度量方法和量纲体系，并发展全新的宏观生态系统研究理论及应用体系，是宏观生态系统科学研究亟待解决的基础理论和方法学问题。本文从传统物理学的属性状态和量纲体系出发，系统论述了定量描述生态系统属性和状态的理论方法、测度变量及量纲体系，提出了生态系统性状（ESTs）和多维度性状网络（ETNs）概念，并将其扩展到宏观生态系统性状的测量和应用分析，期望能够加深对生态系统结构组成、运行机制、状态演变的监测和评估方面的认识，促进区域及全球生态环境保护、资源综合利用和经济社会的可持续发展。

关键词： 大黄蛰虫丸   心脏衰老   网络药理学   分子对接   凋亡   PI3K/AKT/HIF-1α信号通路  

摘要： 研究大黄蛰虫丸（DHZCP）延缓心脏衰老（HA）的作用，并探讨其潜在的作用机制。采用网络药理学和分子对接，探究DHZCP延缓HA的靶点和潜在作用机制，并采用DHZCP含药血清对D-半乳糖（D-gal）诱导的衰老心肌细胞关键靶点和通路进行体外实验验证。通过TCSMP数据库筛选DHZCP的活性成分，并预测起作用的相关靶点；通过GeneCards数据库、OMIM数据库和DisGeNET数据库筛选整合HA相关靶点；将DHZCP活性成分靶点与HA靶点取交集后，通过STRING 12.0数据库构建蛋白网络互作，并运用Cytoscape 3.9.1软件基于degree筛选核心靶点；通过Metaspace平台对核心靶点进行基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析以预测作用机制；并通过AutoDock Vina平台进行分子对接验证。结果显示，共筛选DHZCP活性成分靶点774个，HA相关靶点4 521个，取交集后共得到交集靶点510个，其中核心靶点有B细胞淋巴瘤2基因（BCL-2）、丝氨酸/苏氨酸激酶1（AKT1）和缺氧诱导因子1亚基A（HIF1A）等。GO和KEGG富集分析提示DHZCP主要通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/AKT信号通路、HIF-1α信号通路、长寿信号通路和凋亡等发挥作用。结合GO和KEGG通路富集分析，选择PI3K/AKT/HIF-1α信号通路进行验证。CCK-8检测显示，D-gal能显著抑制H9c2细胞增殖，DHZCP含药血清能增加H9c2细胞活性；SA-β-gal染色检测显示，D-gal组蓝绿色阳性细胞数量显著增加，DHZCP含药血清可以减少蓝绿色阳性细胞数量；TUNEL染色检测显示，DHZCP含药血清可以减少凋亡细胞的数量；经DHZCP含药血清处理后，Klotho、BCL-2、p-PI3K/PI3K、p-AKT1/AKT1和HIF-1α蛋白表达上调，P21、P16、BCL-2相关X蛋白（Bax）和cleaved caspase-3蛋白表达受抑制。结果表明，DHZCP是通过多成分、多靶点和多途径发挥延缓HA的作用，其机制可能是通过激活PI3K/AKT/HIF-1α信号通路减少细胞凋亡而实现的。

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒   YN3   基因组特征   重组  

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）属于具有高度传染性的动脉炎病毒，对全球范围内的眼珠产业带来了沉重的经济打击。本研究，我们从云南某发病猪场分离获得了1株命名为YN3的PRRSV自然感染毒株。全基因组测序与进化分析表明，YN3分离株的完整基因基因序列长度为15278bp（不含poly A），该分离毒株按照基因型分类属于PRRSV-2。值得注意的是，根据重组分析结果，YN3 分离株的主要亲本毒株为HP-PRRSV-like毒株，次要亲本毒株为CH-1a-like，两亲本毒株均属于谱系8，因此该毒株是由谱系8内两种毒株重组而产生的新的重组毒株。分析结果显示，YN3分离株的重组断点分别位于第4903个核苷酸和第8816个核苷酸，其中第4903个核苷酸位于Nsp3基因区，第8816个核苷酸位于Nsp9基因区。根据YN3株来源发病猪的临床症状，初步推测YN3分离株对猪场仍具有一定的危害。本研究结果有助于丰富研究人员对国内PRRSV分离株遗传演化的认识，为制定合理的PRRSV防控策略提供参考依据。

摘要： 2024年9月5日，《新英格兰医学杂志》(NEJM)发表了题为A New Orthonairovirus Associated with Human Febrile Illness的文章，军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所刘玮教授、黎浩教授及中国农业科学院长春兽医研究所李昌研究员为论文通讯作者，张小爱及马一丹为论文共同第一作者。

关键词： 最优控制   竞争种群   污染   极大值原理  

摘要： 本文研究污染环境中生育率和死亡率依赖于加权大小的竞争种群模型的最优控制问题.应用不动点定理得到了上述模型非负解的存在性和唯一性.借助极大值原理验证了最优控制策略的存在性,利用法锥性质获得了针对控制问题的最优条件.

关键词： SVM算法   海洋微生物   种群多样性信息   自适应分类  

摘要： 为了可以精准且高效地实现海洋微生物种群多样性信息分类，本文提出一种基于支持向量机（Support Vector Machine, SVM）算法的海洋微生物种群多样性信息自适应分类方法。通过无线传感器网络展开海洋微生物种群信息采集点的部署，建立海洋微生物种群信息采集信道模型，在带宽受距离约束条件下设计载频频率编码，利用波特间隔均衡控制方法达到海洋微生物种群信息采集优化的目的。在核空间中，对采集的海洋微生物种群信息展开谱聚类，确定具有代表性的信息点，同时引入SVM对全部样本进行训练，最终实现海洋微生物种群多样性信息自适应分类。实验结果表明：所提方法的平均精度均值（mean Average Precision,mAP）稳定在95%以上，可以有效提升海洋微生物种群多样性信息自适应分类的准确性和分类效率。

关键词： 猪流行性腹泻病毒   猪流行性腹泻   基因组   诊断  

摘要： 猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea,PED），是一种急性、高度接触性、高发病率和高致死率的猪肠道传染病，给全球养猪业造成了巨大的经济损失。深入了解PEDV的基因组结构和功能是研制高效安全疫苗的关键。通过解析PEDV的基因组结构、编码的蛋白质以及其与宿主细胞的相互作用，研究人员可以设计出更具针对性的疫苗候选物。诊断技术的进步对于PED的早期诊断及免疫后应答水平监测和评估至关重要。因此，综述了PEDV的基因组结构与功能（包括S、E、M、N、辅助蛋白和非结构蛋白）、血清学以及分子诊断方法[如酶联免疫吸附试验（ELISA）、聚合酶链式反应（PCR）、环介导等温扩增（LAMP）、病毒中和（VN）和间接免疫荧光测定（IFA）、免疫层析试验（ICA）、荧光微球免疫测定（FMIA）、序列测定和聚类规则间隔短回文重复序列（CRISPR）-CRISPR相关蛋白（Cas）]的最新进展，旨在为建立快速有效的PEDV检测方法提供思路，并为临床上有效防控PED提供参考。

关键词： 鸭3型甲肝病毒   分离鉴定   VP1基因  

摘要： 【目的】确定引起安徽某鸭场雏鸭肝脏出血和大量死亡的病原及其遗传进化特征。【方法】对安徽省某鸭场的病死雏鸭中采集的出血肝脏开展鸭已知病原核酸检测、病原分离鉴定和动物回归试验，在明确其病原为鸭3型甲肝病毒（Duck hepatitis A virus type 3, DHAV-3）的基础上分析其VP1基因序列分子特征。【结果】细菌分离结果显示，未分离到细菌；经病毒核酸（RT-）PCR检测结果显示，鸭3型甲肝病毒（DHAV-3）核酸阳性，未检测出其他已知引起鸭肝出血的病毒核酸。将该阳性样品经鸭胚进行病毒分离与传代，发现接种后鸭胚发生死亡，胚体全身出血，对第5代尿囊液经RT-PCR检测为DHAV-3，将其命名为AH230225。经测定，该分离株的鸭胚半数致死量(Effective lethal dose 50, ELD50)为10-4.17/0.1 mL。动物回归试验表明，该毒株对樱桃谷雏鸭的致死率为80%，且攻毒死亡鸭肝脏和肾脏的剖检病变与临床典型病变相近。对该分离毒的VP1基因核苷酸序列进行同源性分析，显示AH230225株的VP1基因核苷酸序列与AH07株DHAV-3（安徽分离株）的同源性最高，为98.8%，与GenBank登录的10株DHAV-3分离株VP1基因核苷酸序列同源性为90.4%～98.8%，而与DHAV-1和DHAV-2的VP1基因核苷酸序列同源性分别为62.1%～63.0%、64.6%～64.9%；基于VP1蛋白氨基酸序列的遗传进化显示，该分离株与AH07株DHAV-3处于同一小进化分支上，亲缘关系最近；而与SD01株、G株和韩国株（AP-04009、AP-03337）等亲缘关系较远，即远离DHAV-1和DHAV-2进化分支。【结论】引起安徽某鸭场雏鸭肝脏出血和大量死亡的病原为鸭3型甲肝病毒DHAV-3，同时明确了该毒株VP1基因的分子特征及遗传进化规律，为深入研究DHAV-3的致病机制和制定防控措施提供科学依据。

关键词： 侧脑室   横窦   腺相关病毒   脑发育  

摘要： 目的 选择侧脑室注射（LVI）与横窦注射（TSI）病毒的方法，比较不同途径介导的腺相关病毒感染新生小鼠脑组织的范围与脑区差异，为研究小鼠发育期特定脑区功能选择病毒注射方法提供参考。方法 对新生一天的C57BL/6仔鼠分别使用两种方法进行rAAV-GAD67-EGFP-WPREs病毒注射，并在第24日收集脑组织样品，制备冰冻切片观察病毒携带的荧光蛋白在小鼠脑内的感染表达范围。结果 LVI方法操作简单，但病毒表达的脑区范围较小，主要集中在大脑皮层。TSI方法操作步骤较复杂，病毒用量更大，但病毒感染的脑区范围更广。结论 不同注射方法会介导工具病毒在不同的脑区范围表达，其中LVI的方法更适合大脑皮层的相关发育研究，TSI的方法适合几乎全部脑区的发育研究。